Karamihan sa mga pathogens ay lumaki

MGA PARAAN NG PAGLINANG NG MICROORGANISMS. PAG-AARAL NG KULTURA AT BIOCHEMICAL

ARI-ARIAN

Ang paglilinang, iyon ay, ang paglilinang ng mga mikroorganismo sa laboratoryo, ay ginagamit upang pag-aralan ang kanilang mga pag-aari at upang makakuha ng biomass. Ang bakterya, fungi, actinomycetes, spirochetes at ilang protozoa ay nalilinang sa nutrient media. Ang Chlamydia, rickettsia, mga virus at ilang mga protozoa ay maaaring magparami lamang sa katawan ng isang hayop o sa mga nabubuhay na selula.

Ang mga katangian ng kultura ng ganitong uri ng mga mikroorganismo ay: 1) ang mga kondisyong kinakailangan para sa pagpaparami, at 2) ang likas na katangian ng paglago sa nutrient media. Ang mga pag-aari sa kultura ay isa sa mga katangian na isinasaalang-alang kapag nakikilala (tinutukoy ang uri) ng mga mikroorganismo.

Culture Media

Dapat matugunan ng media ng kultura ang ilang mga kinakailangan. Dapat silang maglaman ng lahat ng mga kinakailangang nutrisyon para sa pagpaparami ng ganitong uri ng microbes. Ang ilang mga pathogenic microorganism ay lumalaki sa simpleng nutrient media, habang ang iba ay nangangailangan ng pagdaragdag ng dugo, serum ng dugo, at mga bitamina para sa kanilang pagpaparami.

Sa kultura media, ang ilang mga kundisyon ay dapat nilikha sa pamamagitan ng pagdaragdag ng mga solusyon ng sodium chloride o buffer. Para sa karamihan ng mga bakterya, ang isang medium na nakapagpapalusog na naglalaman ng 0.5% sodium chloride ay kanais-nais. Ang reaksyon ng medium na nakapagpapalusog, kanais-nais para sa karamihan ng mga pathogenic bacteria, ay bahagyang alkalina, na tumutugma sa pH = 7.2-7.4. Ang Vibrio cholerae ay lumalaki sa pH = 7.8-8.5, mga kabute - sa pH = 5-5.5. Ang media ng kultura ay dapat na basa-basa, ibig sabihin, maglaman ng sapat na dami ng tubig, maging transparent at sterile hangga't maaari, iyon ay, bago maghasik, ay hindi naglalaman ng mga microbes.

Sa mga tuntunin ng komposisyon at pinagmulan, ang nutrient media ay natural, artipisyal at gawa ng tao. Ang natural na kultura ng media ay likas na mga produkto tulad ng patatas at iba pang mga gulay. Ang artipisyal na nutrient na media ng media ay inihanda alinsunod sa isang tukoy na resipe mula sa mga produkto na may pagdaragdag ng mga organic at inorganic compound. Naglalaman ang synthetic media ng ilang mga kemikal na compound sa mga kilalang konsentrasyon.

Sa pamamagitan ng pagkakapare-pareho, ang nutrient media ay likido, semi-likido, siksik. Ang Agar-agar-polysaccharide na nakahiwalay sa damong-dagat ay karaniwang ginagamit bilang isang sealant. Ang agar-agar ay hindi ginagamit ng mga mikroorganismo bilang isang nakapagpapalusog; bumubuo ito ng isang gel sa tubig na natutunaw sa 100 ° C at lumalakas sa 45 ° C.

Upang makakuha ng isang siksik na daluyan ng nutrient, ang agar-agar ay idinagdag sa isang konsentrasyon na 1.5-2%, para sa semi-likido - 0.5%.

Ayon sa kanilang inilaan na hangarin, ang kultura media ay maaaring nahahati sa ordinaryong (simple), espesyal, elektibo, pagkakaiba sa diagnostic.

Ang maginoo (simple) na nutrient media ay ginagamit para sa paglilinang ng karamihan sa mga mikroorganismo, ito ay mesopatamia sabaw (MPB), mesopatamia agar (MPA).

Ginagamit ang espesyal na nutrient media para sa paglilinang ng mga mikroorganismo na hindi lumalaki sa simpleng media. Halimbawa, agar ng dugo at sabaw ng asukal para sa streptococcus, serum agar para sa meningococcus at gonococcus.

Ginagamit ang elective culture media upang ihiwalay ang isang species mula sa pinaghalong iba't ibang mga bakterya. Ang ganitong uri ng bakterya ay lumalaki sa kapaligiran na ito nang mas mabilis at mas mahusay kaysa sa iba, na lumalabas sa paglaki nito; ang paglago ng iba pang mga bakterya ay naantala sa daluyan na ito. Halimbawa, coagulated serum para sa diphtheria bacillus, alkaline peptone na tubig para sa cholera vibrio, sabaw ng apdo para sa typhoid bacillus, saline media para sa staphylococcus.

Ang magkakaibang diagnostic nutrient media ay ginagamit upang makilala ang ilang mga uri ng bakterya mula sa iba sa pamamagitan ng kanilang aktibidad na enzymatic (tingnan ang kaukulang seksyon).

Paglinang at paghihiwalay ng mga purong kultura ng aerobic bacteria

Para sa paglilinang ng mga mikroorganismo, kinakailangan ang ilang mga kundisyon: mga kondisyon ng temperatura, aerobic o anaerobic.

Ang temperatura ay dapat na pinakamainam para sa species. Karamihan sa mga pathogenic bacteria ay umunlad sa 37 ° C. Gayunpaman, para sa ilang mga species, ang isang mas mababang temperatura ay pinakamainam, na nauugnay sa mga kakaibang katangian ng kanilang ekolohiya. Kaya, para sa salot na bacillus, ang natural na tirahan na kung saan ay mga rodent sa panahon ng pagtulog sa panahon ng taglamig, ang pinakamainam na temperatura ay 28 ° C, pati na rin para sa leptospira, para sa botulism bacillus - 28 ° C-35 ° C.

Bilang karagdagan sa pinakamainam na temperatura, para sa paglilinang ng mga mikroorganismo, depende sa mga species, kinakailangan ang aerobic o anaerobic na kapaligiran.

Upang mapag-aralan ang morpolohiya, pangkulturang, biokimikal at iba pang mga katangian ng microbes, kinakailangan upang makakuha ng isang purong kultura. Kadalasan ang isang kultura ng mga microbes ay tinatawag na kanilang akumulasyon sa isang medium na nakapagpalusog sa anyo ng kaguluhan, paglaki ng malapitan (pader) o isang pelikula sa ibabaw ng isang likidong daluyan o mga kolonya sa isang makakapal na daluyan. Ang isang solong kolonya ay nabuo mula sa isang microbial cell. Ang isang purong kultura ay isang kultura ng mga microbes ng parehong species na nakuha mula sa isang solong kolonya. Sa mga laboratoryo, ang ilang mga kilalang mga strain ng microbes ay ginagamit para sa iba't ibang mga pag-aaral. Ang isang pilay ay isang purong kultura ng mga microbes na nakuha mula sa isang tukoy na mapagkukunan, sa isang tiyak na oras, na may mga kilalang katangian. Karaniwan, ang mga microbial strain ay itinalaga ng isang tukoy na numero. Halimbawa, ang Staphylococcus aureus 209P strain ay ginagamit upang matukoy ang aktibidad ng penicillin.

Ang paghihiwalay ng mga purong kultura ng aerobes ay karaniwang tumatagal ng tatlong araw at isinasagawa ayon sa sumusunod na pamamaraan:

Araw 1 - microscopy ng isang pahid mula sa materyal na pagsubok, nabahiran (karaniwang sa pamamagitan ng Gram) - para sa isang paunang kakilala sa microflora, na maaaring maging kapaki-pakinabang sa pagpili ng isang medium ng kultura para sa inokasyon. Pagkatapos ng inokasyon ng materyal sa ibabaw ng frozen na nutrient agar upang makakuha ng mga nakahiwalay na kolonya. Ang pag-ayos ay maaaring isagawa alinsunod sa pamamaraang Drygalsky sa tatlong mga pinggan ng Petri na may medium na nakapagpalusog. Ang isang patak ng materyal ay inilapat sa unang tasa at kumalat sa buong tasa na may isang spatula. Pagkatapos, sa parehong spatula, ipamahagi ang natitirang kultura dito sa pangalawang tasa at sa parehong paraan sa pangatlo. Ang pinakamalaking bilang ng mga kolonya ay lalago sa unang plato, ang pinakamaliit sa pangatlo. Ang mga nakahiwalay na kolonya ay lalago sa isa sa mga plato, depende sa kung gaano karaming mga microbial cells ang nasa materyal na pagsubok.

Ang parehong resulta ay maaaring makamit sa pamamagitan ng sieving sa isang tasa. Upang magawa ito, hatiin ang tasa sa apat na sektor. Ang materyal na pinag-aaralan ay inoculated ng isang bacteriological loop na may mga stroke sa unang sektor, pagkatapos, na nakakalkula at pinalamig ang loop, ang inokulasyon ay ipinamamahagi mula sa unang sektor hanggang sa pangalawa at sa parehong paraan nang sunud-sunod sa pangatlo at ikaapat na sektor. Ang mga nakahiwalay na kolonya ay nabuo mula sa mga indibidwal na microbial cells pagkatapos ng pang-araw-araw na pagpapapisa sa isang termostat.

Ika-2 araw - pag-aaral ng mga kolonya na lumaki sa mga plato, paglalarawan sa kanila. Ang mga kolonya ay maaaring maging transparent, translucent o opaque, mayroon silang magkakaibang sukat, bilugan na regular o hindi regular na mga balangkas, matambok o patag na hugis, makinis o magaspang na ibabaw, makinis o kulot, may gilid na mga gilid. Maaari silang walang kulay o puti, ginintuang, pula, dilaw. Batay sa pag-aaral ng mga katangiang ito, ang mga lumago na kolonya ay nahahati sa mga pangkat. Pagkatapos ang isang nakahiwalay na kolonya ay napili mula sa pangkat ng pag-aaral, isang pahid ang inihanda para sa pagsusuri ng mikroskopiko upang suriin ang homogeneity ng mga microbes sa kolonya. Ang parehong kolonya ay inoculated sa isang test tube na may isang slant nutrient agar.

Ika-3 araw - suriin ang kadalisayan ng kultura na lumago sa agar slant sa pamamagitan ng smear microscopy. Sa homogeneity ng mga pinag-aralan na bakterya, ang paghihiwalay ng isang purong kultura ay maaaring maituring na kumpleto.

Upang makilala ang nakahiwalay na bakterya, pinag-aaralan ang mga katangian ng kultura, iyon ay, ang likas na katangian ng paglaki sa likido at solidong nutrient media. Halimbawa, ang streptococci sa sabaw ng asukal ay bumubuo ng isang ilalim at parietal sediment, sa agar ng dugo - maliit, matukoy ang mga kolonya; bumubuo ang cholera vibrio ng isang pelikula sa ibabaw ng tubig na alkalina peptone, at mga transparent na kolonya sa alkalina agar; ang salot bacillus sa nutritive agar ay bumubuo ng mga kolonya sa anyo ng "mga panyo sa puntas" na may isang siksik na gitna at manipis na kulot na mga gilid, at sa isang likidong nutrient na nutrient - isang pelikula sa ibabaw, at pagkatapos ay ang mga filament na umaabot mula dito sa anyo ng "stalactites ".

Paglinang at paghihiwalay ng mga purong kultura ng anaerobic bacteria

Para sa paglilinang ng mga anaerobes, kinakailangang ibaba ang potensyal na pagbabawas ng oksihenasyon ng daluyan, upang lumikha ng anaerobiosis sa pamamagitan ng pag-aalis ng oxygen sa pamamagitan ng pisikal, kemikal o biological na pamamaraan.

Kasama sa mga pisikal na pamamaraan ang:

1) mekanikal na pagtanggal ng hangin sa pamamagitan ng isang bomba mula sa anae-rostat, kung saan inilalagay ang mga pinggan na may mga inokasyon. Sa parehong oras, maaari mong palitan ang hangin ng isang walang malasakit na gas: nitrogen, hydrogen, carbon dioxide.

2) lumalaki sa isang daluyan na naglalaman ng pagbawas ng mga sangkap. Ang Kitta-Tarozzi Miyerkules ay isang sabaw ng asukal na may mga piraso ng atay o karne. Ang glucose at mga piraso ng organo ay may kakayahang magbawas. Ang daluyan ay ibinuhos sa itaas na may isang layer ng langis ng vaseline upang harangan ang pag-access ng oxygen sa hangin.

3) Ang pinakasimpleng, ngunit hindi gaanong maaasahang pamamaraan ay upang lumago nang malalim sa isang matangkad na haligi ng asukal agar.

Ang mga pamamaraan ng kemikal ay binubuo sa ang katunayan na ang mga pinggan na may mga pananim ng anaerobes ay inilalagay sa isang hermetically selyadong desiccator, kung saan inilalagay ang mga kemikal, halimbawa, pyrogallol at alkali, ang reaksyon sa pagitan ng paglipas ng pagsipsip ng oxygen.

Ang biological na pamamaraan ay batay sa sabay-sabay na paglilinang ng anaerobes at aerobes sa solidong nutrient media sa mga pinggan ng Petri, na hermetically selyadong pagkatapos ng inokasyon. Una, ang oxygen ay hinihigop ng lumalaking mga aerobes, at pagkatapos ay nagsisimula ang paglago ng mga anaerobes.

Ang paghihiwalay ng isang purong kultura ng anaerobes ay nagsisimula sa akumulasyon ng anaerobic bacteria sa pamamagitan ng inokulasyon sa daluyan ng Kitta-Tarozzi. Sa hinaharap, ang mga nakahiwalay na kolonya ay nakuha sa isa sa dalawang paraan:

1) ang materyal ay inoculated sa pamamagitan ng paghahalo sa tinunaw na maligamgam na asukal na agar sa mga tubo ng salamin. Matapos ang pagpapatayo ng agar, ang mga nakahiwalay na kolonya ay lumalaki sa kailaliman nito, na tinanggal sa pamamagitan ng paggupit ng tubo at nai-subculture sa medium na Kitt-Tarozzi (pamamaraan ni Weinberg);

2) ang inokasyon ng materyal ay isinasagawa sa mga plato na may medium na nakapagpalusog at napapaloob sa isang anaerostat. Ang mga nakahiwalay na kolonya na lumaki sa isang plato ay nai-subculture sa medium na Kitt-Tarozzi (pamamaraang Zeissler).

Paglinang ng iba pang mga mikroorganismo

Paglinang ng mycoplasmas

Ang Mycoplasmas ay pinag-aralan sa nutrient media na suplemento ng suwero at karbohidrat. Dahil ang mycoplasmas ay kulang sa isang cell wall, lumalaki lamang sila sa mga isotonic o hypertonic na kapaligiran. Sa solidong nutrient media, sa loob ng maraming araw, napakaliit na mga kolonya ang nabuo, na kahawig ng mga pritong itlog - na may isang convex center at isang flat translucent periphery. Ang Mycoplasmas ay maaari ding palaguin sa mga embryo ng manok o kultura ng cell.

Paglinang ng rickettsia at chlamydia

Ang Rickettsiae at chlamydiae ay obligado ng intracellular parasites. Para sa kanilang paglilinang, ginagamit ang mga cell culture, embryo ng manok at impeksyon ng hayop.

Paglilinang ng kabute

Para sa paglilinang ng mga kabute, ang siksik at likidong nutrient media ay ginagamit: madalas na daluyan ni Sabouraud, pati na rin ang media na naglalaman ng wort ng beer. Ang mga kabute ay lumalaki nang mas mabagal kaysa sa bakterya, bumubuo ang mga ito ng nakikitang paglago sa loob ng ilang araw. Ang temperatura ng paglilinang ay mas mababa kaysa sa bakterya - 22-30 ° C.

Paglinang ng mga spirochetes at protozoa

Kabilang sa mga spirochetes, pinakamadaling palaguin ang leptospira, kung saan ang tubig na may halong serbula ng dugo ng kuneho ay maaaring magsilbing medium ng nutrient.Ang Borrelia at treponema ay nalilinang sa ilalim ng mga kondisyon ng anaerobic sa mas kumplikadong nutrient media na naglalaman ng suwero, mga piraso ng tisyu ng hayop.

Kabilang sa mga protozoa, ang dysentery amoeba, lamblia, Trichomonas, leishmania, trypanosome, balantidia ay nalilinang sa nutrient media. Ang Toxoplasma ay nalilinang sa mga embryo ng manok at mga kultura ng tisyu. Ang mga pamamaraan sa paglilinang para sa malaria plasmodia ay nasa ilalim ng pag-unlad.

Mga pamamaraan para sa pag-aaral ng aktibidad na enzymatic (mga katangian ng biochemical)

Sa kasanayan sa microbiological, ang pag-aaral ng aktibidad na enzymatic ay ginagamit upang makilala ang mga mikroorganismo, dahil ang bawat species ng microbial ay may isang tiyak na hanay ng mga enzyme.

Upang matukoy ang aktibidad ng proteolytic, ang mga microbes ay inoculated na may isang iniksyon sa isang haligi ng gelatin, at pagkatapos ng 3-5 araw ng pagpapapisa sa temperatura ng kuwarto, nabanggit ang katangian ng gelatin liquefaction: sa anyo ng isang funnel, isang kuko, isang stocking o sa anyo ng isang nakabaligtad na punungkahoy ng Pasko. Ang aktibidad ng protolytictic ay natutukoy din sa pamamagitan ng pagbuo ng mga produkto ng agnas ng protina: indole, hydrogen sulfide, ammonia. Upang matukoy ang mga ito, ang mga mikroorganismo ay inoculated sa sabaw ng meat-peptone, at ang mga papel na tagapagpahiwatig ay inilalagay sa pagitan ng leeg ng test tube at isang cotton stopper, hindi kasama ang kanilang pakikipag-ugnay sa daluyan. Kapag nabuo ang indole, ang papel na pinapagbinhi ng isang puspos na solusyon ng oxalic acid ay nakakakuha ng isang kulay-rosas na kulay; sa pagkakaroon ng hydrogen sulfide, ang papel na pinapagbinhi ng lead acetate ay nagiging itim; kapag nabuo ang amonya, ang pulang papel na litmus ay nagiging asul.

Upang matukoy ang mga katangiang saccharolytic ng mga microbes, ginagamit ang kaugalian na diagnostic media, tulad ng Giss media, medium ni Olkenitsky, medium ni Endo, medium ni Levin, medium ng Ploskirev.

Ang Media Endo, Levin, Ploskirev sa mga pinggan sa Petri ay ginagamit upang maiiba ang mga bakterya ng bituka na pangkat sa pamamagitan ng kanilang kakayahang mag-ferment ng lactose. Naglalaman ang media na ito ng nutrient agar, lactose at isang tagapagpahiwatig na nagbabago ng kulay sa isang acidic medium - isang tagapagpahiwatig ng pH. Kung maghasik ka ng bakterya na nagpapalaki ng lactose, tulad ng E. coli, sa gayong kapaligiran, nabubuo ang acid bilang resulta ng pagbuburo ng lactose, at ang tagapagpahiwatig ay magbabago ng kulay sa isang acidic na kapaligiran. Samakatuwid, ang mga kolonya ng Escherichia coli sa naturang media ay may kulay ayon sa kulay ng tagapagpahiwatig: sa daluyan nina Endo at Ploskirev - na pula, sa daluyan ni Levin - sa itim at asul. Ang mga kolonya ng bakterya na hindi nagbubuklod ng lactose, tulad ng salmonella at mga stick ng disenteriya, ay walang kulay.

Ang Giss media (medium "variegated") ay inihanda batay sa tubig ng peptone o semi-likidong karne-peptone agar. Naglalaman ng anumang isang karbohidrat o polyhydric na alak at isang tagapagpahiwatig. Kapag lumaki ang isang microbe sa daluyan ni Giss, na pinapaloob ang substrate na ito sa pagbuo ng acid at gas, ang medium ay magbabago ng kulay, sa isang medium na likidong likido, ang mga bula at rupture ay lilitaw sa kapal ng agar, sa isang likidong likido - a gas bubble sa isang baso na lumutang. Kapag ang substrate ay fermented lamang sa acid, isang pagbabago lamang sa kulay ng daluyan ang nangyayari.

Ang pinagsamang media na naglalaman ng hindi isang karbohidrat, ngunit dalawa o tatlo din ang ginagamit, halimbawa, medium ni Olkenitsky. Ang isang tubo ng daluyan na ito ay pinapalitan ang agar slant at Giss media ng lactose, glucose at sukrosa. Pagkatapos ng isterilisasyon sa tinunaw na estado, ang daluyan ng test tube ay na-beveled upang ang isang haligi at isang beveled na bahagi ay nakuha. Ang paghahasik ay tapos na sa isang stroke sa beveled na bahagi at isang prick sa isang haligi. Kapag ang lactose o sucrose ay fermented, ang kulay ng buong daluyan ay nagbabago; kapag ang isang glucose ay fermented, ang kulay lamang ng haligi ang nagbabago. Ang pagbuo ng gas ay ipinahiwatig ng pagkakaroon ng mga bula sa haligi ng agar. Kapag naglabas ang microbes ng ammonia, ang kulay ng daluyan ay hindi nagbabago. Ang pagbuo ng hydrogen sulfide ay ipinakita sa pamamagitan ng pagitim sa agar table

Para sa malinaw na pamamaraan para sa pagtukoy ng aktibidad na enzymatic ng bakterya, ginagamit ang mga microtest system at isang sistema ng tagapagpahiwatig ng papel (NIB)

Ang microtest system ay isang lalagyan na gawa sa transparent polystyrene, na binubuo ng maraming mga cell. Ang mga cell ay naglalaman ng pinatuyong nutrient media na may mga karbohidrat at tagapagpahiwatig ng pH. Ang isang suspensyon ng isang kultura ng bakterya ng isang tiyak na density ay na-inoculate sa bawat cell. Ang isang solusyon ng asin ay ibinuhos sa control cells.mga kulay

tagapagpahiwatig

Ang mga sistema ng tagapagpahiwatig ng papel (NIB) para sa pagkilala sa pamilyang enterobacteriaceae ay mga disk o piraso ng chromatographic paper, natatakpan ng isang proteksiyon na pelikula at naglalaman ng isang tukoy na substrate at isang tagapagpahiwatig. Sa pamamagitan ng pagbabago ng kulay ng tagapagpahiwatig Upang matukoy ang hydrogen sulfide, ang disk ay inilagay sa ibabaw ng MPA, binuran ng isang iniksyon, na ginagawang posible na sabay na matukoy ang kadaliang kumilos

Sa lahat ng mga tubo, ang paunang resulta sa parehong araw at ang pangwakas na resulta sa susunod na araw ay isinasaalang-alang.

Ang aktibidad ng oxidase ay natutukoy sa pamamagitan ng paghuhugas ng kultura sa isang tagapagpahiwatig na papel. Ang resulta ay isinasaalang-alang pagkatapos ng isang minuto.

Ang mga mikroorganismo (maliban sa obligasyon ng intracellular parasites - rickettsia, chlamydia, virus at protozoa) ay karaniwang nalinang sa artipisyal na nutrient media. Nakasalalay sa mga kinakailangan sa nutrisyon ng isa o ibang uri ng nutrient media na dapat maglaman ng naaangkop na mga panimulang sangkap na kinakailangan para sa plastik at metabolismo ng enerhiya.

Ang paghihiwalay ng mga mikroorganismo mula sa iba't ibang mga materyales at paggawa ng kanilang mga kultura ay malawakang ginagamit sa pagsasanay sa laboratoryo para sa mga diagnostic ng microbiological ng mga nakakahawang sakit, sa gawaing pagsasaliksik at sa paggawa ng mga bakunang microbiological, antibiotics at iba pang mga biologically active na produkto ng microbial vital na aktibidad.

Ang mga kondisyon sa paglilinang ay nakasalalay din sa mga pag-aari ng kani-kanilang mga mikroorganismo. Karamihan sa mga pathogenic microbes ay lumago sa nutrient media na 37 ° C sa loob ng 12 araw. Gayunpaman, ang ilan sa kanila ay nangangailangan ng mas mahabang oras ng pamumuno. Halimbawa, whooping ubo bakterya - sa 2-3 araw, at mycobacterium tuberculosis - sa 3-4 na linggo.

Upang pasiglahin ang mga proseso ng paglago at pagpaparami ng mga aerobic microbes, pati na rin upang mabawasan ang oras ng kanilang paglilinang, ginagamit ang pamamaraan ng paglubog na paglilinang, na binubuo ng tuluy-tuloy na aeration at pagpapakilos ng medium ng nutrient. Ang malalim na pamamaraan ay nakakita ng malawak na aplikasyon sa biotechnology.

Para sa paglilinang ng mga anaerobes, ginagamit ang mga espesyal na pamamaraan, ang kakanyahan na alisin ang hangin o palitan ito ng mga inert gas sa mga selyadong termostat - anaerostats. Ang mga anaerobes ay lumaki sa nutrient media na naglalaman ng pagbabawas ng mga sangkap (glucose, sodium formate, atbp.) Na nagbabawas ng potensyal ng redox.

Sa kasanayan sa diagnostic, ang mga dalisay na kultura ng bakterya ay may partikular na kahalagahan, na ihiwalay mula sa materyal na pagsubok na kinuha mula sa isang pasyente o mga bagay sa kapaligiran. Para sa hangaring ito, ginagamit ang artipisyal na nutrient media, na nahahati sa pangunahing, kaugalian na diagnostic at elective media ng pinaka-magkakaibang komposisyon. Ang pagpili ng isang medium na nakapagpalusog para sa paghihiwalay ng isang purong kultura ay mahalaga para sa mga diagnostic na bacteriological.

Sa karamihan ng mga kaso, ginagamit ang solidong media ng kultura, na dati ay ibinuhos sa mga pinggan ng Petri. Ang materyal na pagsubok ay inilalagay sa ibabaw ng daluyan sa isang loop at triturated na may isang spatula upang makakuha ng nakahiwalay na mga kolonya na lumago mula sa isang cell. Ang subcultural ng isang nakahiwalay na kolonya sa agar slant sa isang test tube ay nagreresulta sa isang purong kultura.

Para sa pagkakakilanlan, ibig sabihin pagtukoy ng generic at species na kabilang sa napiling kultura, ang mga phenotypic character ay madalas na pinag-aaralan:

a) ang morpolohiya ng mga cells ng bakterya sa mga namantsang smear o katutubong paghahanda;

b) mga palatandaang biochemical ng kultura ayon sa kakayahang mag-ferment ng mga carbohydrates (glucose, lactose, sucrose, maltose, mannitol, atbp.), upang makabuo ng indole, ammonia at hydrogen sulfide, na mga produkto ng aktibidad na proteolytic ng bacteria.

Para sa isang mas kumpletong pagtatasa, ginagamit ang gas-liquid chromatography at iba pang mga pamamaraan.

Kasabay ng mga pamamaraang bacteriological para sa pagkilala ng mga purong kultura, malawakang ginagamit ang mga pamamaraang pananaliksik sa immunological, na naglalayon sa pag-aaral ng antigenic na istraktura ng nakahiwalay na kultura. Para sa hangaring ito, ginagamit ang mga reaksyon ng serological: aglutinasyon, pagbagsak ng immunofluorescence, komplementong pagbigkis, enzyme immunoassay, mga pamamaraang radioimmunoassay, atbp.

1. Mga pamamaraan sa paghihiwalay ng purong kultura

Upang ihiwalay ang isang purong kultura ng mga mikroorganismo, kinakailangan upang paghiwalayin ang maraming mga bakterya na nasa materyal, isa mula sa isa pa. Maaari itong makamit sa mga pamamaraan na batay sa dalawang prinsipyo -mekanikal atbiyolohikal paghiwalay ng bakterya.

Mga pamamaraan para sa paghihiwalay ng mga purong kultura batay sa isang mekanikal na prinsipyo

Paraan ng panghalo ng serial, na iminungkahi ni L. Pasteur, ay isa sa mga pinakauna, na ginamit para sa mekanikal na paghihiwalay ng mga mikroorganismo. Binubuo ito sa pagsasagawa ng mga serial serial dilutions ng isang materyal na naglalaman ng mga microbes sa isang sterilelikidomedium ng nutrient. Ang pamamaraan na ito ay sa halip ay masipag at hindi perpekto sa trabaho, dahil hindi ka nito pinapayagan na kontrolin ang bilang ng mga microbial cells na pumapasok sa mga tubo ng pagsubok sa panahon ng mga dilutions.

Wala itong kawalanParaan ng Koch (paraan ng pagbabanto ng plato). Gumamit si R. Koch ng solidong nutrient media batay sa gelatin o agar-agar. Ang materyal na may mga asosasyon ng iba't ibang mga uri ng bakterya ay natutunaw sa maraming mga tubo sa pagsubok na may natunaw at bahagyang pinalamig na gulaman, na ang nilalaman nito ay ibinuhos kalaunan sa mga sterile plate ng salamin. Pagkatapos ng gelation ng daluyan, nilinang ito sa pinakamainam na temperatura. Nakahiwalay na mga kolonya ng mga mikroorganismo na nabuo sa kapal nito, na madaling mailipat sa isang sariwang medium na nakapagpalusog gamit ang isang platinum loop upang makakuha ng isang purong kultura ng bakterya.

Paraan ni drygalskiay isang mas advanced na pamamaraan na malawakang ginagamit sa pang-araw-araw na kasanayan sa microbiological. Una, ang materyal na pagsubok ay inilapat sa ibabaw ng daluyan sa isang ulam na Petri na may pipette o loop. Gamit ang isang metal o baso spatula, kuskusin itong kuskusin sa daluyan. Ang ulam ay pinananatiling bukas habang binubhi at dahan-dahang iniikot upang ipamahagi nang pantay-pantay ang materyal. Nang hindi isteriliser ang spatula, isinasagawa nila ang hiniram na materyal sa isa pang ulam ng Petri, kung kinakailangan, sa isang ikatlo. Lamang pagkatapos ay ang spatula ay nahuhulog sa isang disinfectant solution o pinirito sa isang burner flame. Sa ibabaw ng daluyan, sa unang pinggan, sinusunod namin, bilang panuntunan, ang tuluy-tuloy na paglaki ng bakterya, sa pangalawa - siksik na paglaki, at sa pangatlo - paglaki sa anyo ng mga nakahiwalay na kolonya.

Mga kolonya ng pamamaraan ng Drigalski

Paraan ng kultura ng linyangayon ito ay madalas na ginagamit sa mga microbiological laboratories. Ang materyal na naglalaman ng mga mikroorganismo ay nakolekta gamit ang isang bacteriological loop at inilapat sa ibabaw ng medium ng kultura malapit sa gilid ng ulam. Alisin ang labis na materyal at iguhit ito sa mga parallel stroke mula sa gilid hanggang sa gilid ng tasa. Matapos ang isang araw ng pagpapapisa ng itlog sa pinakamainam na temperatura, ang mga nakahiwalay na kolonya ng mga microbes ay lumalaki sa ibabaw ng ulam.

Paraan ng stroke

Upang makakuha ng mga nakahiwalay na kolonya, maaari kang gumamit ng isang sakop na pamunas, na ginamit upang kolektahin ang materyal sa pagsubok. Buksan ang pinggan ng Petri na may medium na nakapagpapalusog, maglagay ng tampon dito at kuskusin ang materyal sa ibabaw ng ulam na may maingat na paggalaw, unti-unting ibabalik ang tampon at ang ulam.

Samakatuwid, isang makabuluhang bentahe ng Koch, Drygalsky at mga guhit na pamamaraan ng kultura ng mga dilutions ng plato ay lumilikha sila ng mga nakahiwalay na kolonya ng mga mikroorganismo, kung saan, kapag na-inoculate sa isa pang medium na nakapagpapalusog, naging isang purong kultura.

Mga pamamaraan para sa paghihiwalay ng mga purong kultura batay sa isang biological na prinsipyo

Ang biological na prinsipyo ng paghihiwalay ng bakterya ay nagbibigay para sa isang may layunin na paghahanap para sa mga pamamaraan na isinasaalang-alang ang maraming mga katangian ng mga microbial cells. Kabilang sa mga pinaka-karaniwang pamamaraan ay ang mga sumusunod:

1. Sa pamamagitan ng uri ng paghinga. Ang lahat ng mga mikroorganismo sa pamamagitan ng uri ng paghinga ay nahahati sa dalawang pangunahing mga grupo:aerobic (Corynebacterium diphtheriaeVibrio сholerae atbp) atanaerobic (Clostridium tetaniClostridium botulinumClostridium perfringens at iba pa.)... Kung ang materyal na kung saan dapat ihiwalay ang mga anaerobic pathogens ay paunang nainitan at pagkatapos ay nalinang sa ilalim ng mga kundisyon ng anaerobic, kung gayon ang mga bakteryang ito ay lalago.

2. Nisporulation. Nabatid na ang ilang mga microbes (bacilli at clostridia) ay may kakayahang pagkamayabong. Sa kanilaClostridium tetaniClostridium botulinumClostridium perfringensBacillus subtilisBacillus Cereus... Ang mga pagtatalo ay lumalaban sa pagkilos ng mga kadahilanan sa kapaligiran. Dahil dito, ang materyal na pagsubok ay maaaring mapailalim sa pagkilos ng isang thermal factor, at pagkatapos ay mailipat sa isang medium ng nutrient. Pagkatapos ng ilang oras, eksaktong mga bakterya na may kakayahang pagkamayabong ay lalago dito.

3. Paglaban ng mga microbes sa mga acid at alkalis. Ilang mikrobyo(Mycobacterium tuberculosisMycobacterium bovis) bilang isang resulta ng mga kakaibang katangian ng kanilang istrakturang kemikal, lumalaban sila sa pagkilos ng mga acid. Iyon ang dahilan kung bakit ang materyal na naglalaman ng mga ito, halimbawa, plema sa tuberculosis, ay prereated na may pantay na dami ng 10% na solusyon ng sulfuric acid, at pagkatapos ay nahasik sa nutrient media. Namatay ang labis na flora, at mycobacteria, bilang isang resulta ng kanilang paglaban sa mga acid, lumalaki.

Cholera vibrio(Vibrio сholerae)sa kabaligtaran, ito ay isang halophilic na bakterya, samakatuwid, upang lumikha ng pinakamainam na mga kondisyon ng paglago, ito ay naihasik sa media na naglalaman ng alkali (1% na alkalina peptone na tubig). Sa loob ng 4-6 na oras, lilitaw ang mga katangian ng palatandaan ng paglago sa ibabaw ng daluyan sa anyo ng isang maselan na bluish film.

4. Pagkilos ng bakterya. Ilang mikrobyo(Proteus vulgaris) may isang ugali na gumapang at mabilis na kumalat sa ibabaw ng isang bagay na mahalumigmig. Upang ihiwalay ang mga naturang pathogens, sila ay inoculated sa isang droplet ng likido ng paghalay, na nabuo kapag ang agar slant ay pinalamig. Pagkatapos ng 16-18 taon, kumalat sila sa buong ibabaw ng kapaligiran. Kung kukuha kami ng materyal mula sa tuktok ng agar, magkakaroon kami ng isang purong kultura ng mga pathogens.

5. Ang pagiging sensitibo ng mga microbes sa pagkilos ng mga kemikal, antibiotics at iba pang mga ahente ng antimicrobial.Bilang isang resulta ng mga katangian ng metabolismo ng bakterya, maaari silang magkaroon ng iba't ibang pagiging sensitibo sa ilang mga kadahilanan ng kemikal. Alam na ang staphylococci, aerobic bacilli na bumubuo ng mga spore, ay lumalaban sa pagkilos ng 7.5-10% sodium chloride. Iyon ang dahilan kung bakit para sa paghihiwalay ng mga pathogens na ito, ginagamit ang elective nutrient media (yolk-salt agar, beckon-salt agar), na naglalaman ng mismong sangkap na ito. Ang iba pang mga bakterya ay praktikal na hindi lumalaki sa konsentrasyong ito ng sodium chloride.

6. Pangangasiwa ng ilang mga antibioticsGinagamit ang (nystatin) upang pigilan ang paglaki ng fungi sa materyal na labis na nahawahan sa kanila. Sa kabaligtaran, ang pagdaragdag ng antibiotic penicillin sa daluyan ay nagtataguyod ng paglago ng flora ng bakterya kung ang mga fungi ay ihiwalay. Ang pagdaragdag ng furazolidone sa ilang mga konsentrasyon sa medium ng nutrient ay lumilikha ng mga piling kondisyon para sa paglago ng corynebacteria at micrococci.

7. Ang kakayahan ng mga mikroorganismo na tumagos sa buo na balat. Ang ilang mga pathogenic bacteria(Yersinia pestis) bilang isang resulta ng pagkakaroon ng isang malaking bilang ng mga enzyme ng pagsalakay, maaari silang tumagos sa pamamagitan ng buo na balat. Para sa mga ito, ang lana sa katawan ng hayop sa laboratoryo ay ahit at ang materyal na pagsubok ay inilagay sa lugar na ito, na naglalaman ng pathogen at isang malaking halaga ng third-party microflora. Makalipas ang ilang sandali, ang hayop ay papatayin, at ang mga microbes ay pinakawalan mula sa dugo o mga panloob na organo.

8. Sensitivity ng mga hayop sa laboratoryo sa mga nakakahawang ahente.Ang ilang mga hayop ay lubos na sensitibo sa iba't ibang mga mikroorganismo.

Halimbawa, sa anumang ruta ng pangangasiwaStreptococcus pneumoniaeang mga puting daga ay nagkakaroon ng pangkalahatang impeksyon sa pneumococcal. Ang isang katulad na larawan ay sinusunod kapag ang mga guinea pig ay nahawahan ng mga pathogens ng tuberculosis.(Mycobacterium tuberculosis).

Sa pang-araw-araw na pagsasanay, ang mga bacteriologist ay gumagamit ng mga konsepto tulad ngpilitinatpuro kulturamga mikroorganismo. Ang isang pilay ay naiintindihan na nangangahulugang microbes ng parehong species, na kung saan ay ihiwalay mula sa iba't ibang mga mapagkukunan, o mula sa parehong mapagkukunan, ngunit sa iba't ibang oras. Ang isang purong kultura ng bakterya ay mga mikroorganismo ng parehong species, mga inapo ng isang microbial cell, na lumago sa (sa) isang medium na nakapagpalusog.

Paghiwalay ng purong kultura aerobny mga mikroorganismo binubuo ng isang bilang ng mga yugto.

Unang araw(Pananaliksik sa yugto 1) ang materyal na pathological ay dadalhin sa isang isterilisadong lalagyan (test tube, flask, bote). Pinag-aaralan nila ito - ang hitsura, pagkakayari, kulay, amoy at iba pang mga palatandaan, maghanda ng isang pahid, pintura at suriin ito sa ilalim ng isang mikroskopyo. Sa ilang mga kaso (talamak na gonorrhea, salot), isang paunang pagsusuri ay maaaring gawin sa yugtong ito, at bilang karagdagan, posible na piliin ang daluyan kung saan mailalagay ang materyal. Pagkatapos ay nagsasagawa sila ng isang bacteriological loop (pinaka-madalas na ginagamit), gamit ang isang spatula - ng pamamaraang Drygalsky, na may isang cotton-gauze swab. Ang mga tasa ay sarado, nakabaligtad, nilagdaan ng isang espesyal na lapis at inilalagay sa isang termostat sa isang pinakamainam na temperatura (37 ° C) sa loob ng 18-48 na oras. Ang layunin ng yugtong ito ay upang makakuha ng mga nakahiwalay na kolonya ng mga mikroorganismo.

Gayunpaman, kung minsan upang maitambak ang materyal, ito ay nahasik sa likidong nutrient media.

Sa ikalawang araw(Pananaliksik sa yugto 2) sa ibabaw ng isang siksik na daluyan ng pagkaing nakapagpalusog, ang mga mikroorganismo ay bumubuo ng isang tuloy-tuloy, siksik na paglaki o mga nakahiwalay na kolonya.Ang kolonya - Ito ang mga naipong bakterya na nakikita ng hubad na mata sa ibabaw o sa kapal ng medium ng nutrient. Bilang isang patakaran, ang bawat kolonya ay nabuo mula sa mga supling ng isang microbial cell (mga clone), samakatuwid ang kanilang komposisyon ay medyo magkatulad. Ang mga tampok ng paglaki ng bakterya sa nutrient media ay isang pagpapakita ng kanilang mga katangiang pangkultura.

Sinusuri ang mga plato at sinuri para sa mga nakahiwalay na kolonya na lumaki sa ibabaw ng agar. Bigyang-pansin ang laki, hugis, kulay, likas na katangian ng mga gilid at ibabaw ng mga kolonya, ang kanilang pagkakapare-pareho at iba pang mga tampok. Kung kinakailangan, suriin ang mga kolonya sa ilalim ng isang magnifying glass, mababa o mataas na paglaki ng microscope. Ang istraktura ng mga kolonya ay sinusuri sa naihatid na ilaw sa mababang paglaki ng microscope. Maaari silang maging hyaline, granular, filamentous o fibrous, na nailalarawan sa pagkakaroon ng magkakaugnay na mga thread sa kapal ng mga kolonya.

Ang paglalarawan ng mga kolonya ay isang mahalagang bahagi ng gawain ng isang bacteriologist at katulong sa laboratoryo, dahil ang mga mikroorganismo ng bawat species ay may kani-kanilang mga espesyal na kolonya.

Sa ikatlong araw(Pananaliksik sa yugto ng 3) pag-aralan ang likas na katangian ng paglago ng isang purong kultura ng mga mikroorganismo at isagawa ang pagkakakilanlan nito.

Una, binibigyang pansin nila ang mga kakaibang uri ng paglago ng mga mikroorganismo sa daluyan at gumawa ng isang pahid, paglamlam nito sa pamamaraang Gram, upang masuri ang kultura para sa kadalisayan. Kung ang mga bakterya ng parehong uri ng morpolohiya, laki at tinctorial (kakayahang pintura) ang mga katangian ay sinusunod sa ilalim ng isang mikroskopyo, napagpasyahan na ang kultura ay dalisay. Sa ilang mga kaso, na sa hitsura at mga katangian ng kanilang paglaki, posible na kumuha ng isang konklusyon tungkol sa uri ng mga pathogens na nakahiwalay. Ang pagtukoy ng uri ng bakterya sa pamamagitan ng kanilang mga katangian na morphological ay tinatawag na pagkilala sa morphological.Ang pagtukoy ng uri ng mga pathogens sa pamamagitan ng kanilang mga katangian sa kultura ay tinatawag na pagkakakilanlan sa kultura.

Gayunpaman, ang mga pag-aaral na ito ay hindi sapat upang makagawa ng isang pangwakas na konklusyon tungkol sa uri ng nakahiwalay na mga microbes. Samakatuwid, pinag-aaralan nila ang mga katangian ng biochemical ng bakterya. Sila ay magkakaibang.

1. Pagkilala sa bakterya.

Ang pagtukoy ng uri ng pathogen ng mga katangian ng biochemical nito ay tinatawag na pagkakakilanlan ng biochemical.

Upang maitaguyod ang mga species ng bakterya, ang kanilang istrakturang antigenic ay madalas na pinag-aralan, iyon ay, nakikilala sila ng mga katangian ng antigenic. Ang bawat microorganism ay naglalaman ng iba't ibang mga antigenic na sangkap. Sa partikular, ang mga kinatawan ng pamilyang enterobacteriaceae (Yesherichia, Salmoneli, Shigela) ay naglalaman ng membrane O-antigen, flagellate H-antigen at capsular K-antigen. Ang mga ito ay magkakaiba sa kanilang kemikal na komposisyon, samakatuwid umiiral sila sa maraming mga pagkakaiba-iba. Maaaring matukoy ang mga ito gamit ang tiyak na pinagsasama-sama na sera. Ang kahulugan ng uri ng bakterya ay tinatawag pagkakakilanlan ng serological.

Minsan ang mga bakterya ay nakilala sa pamamagitan ng paghawa sa mga hayop sa laboratoryo na may isang purong kultura at pagmamasid sa mga pagbabago na sanhi ng mga pathogens sa katawan (tuberculosis, botulism, tetanus, salmonellosis, atbp.). Ang pamamaraang ito ay tinawag pagkakakilanlan ng mga biological na katangian... Bilang mga bagay - ang mga guinea pig, puting daga at daga ang madalas gamitin.

ANNEXES

(mga talahanayan at diagram)

Pisyolohiya ng bakterya

Scheme 1. Physiology ng bakterya.

nutrisyon

hininga

taas

pagpaparami

lumalaki sa nutrient media

Talahanayan 1. Pangkalahatang talahanayan ng physiology ng bakterya.

№	Konsepto	Katangian
	Nutrisyon	Ang proseso ng pagkuha ng enerhiya at sangkap.
	Hininga	Ang isang hanay ng mga proseso ng biochemical, bilang isang resulta kung saan ang enerhiya na kinakailangan para sa mahalagang aktibidad ng mga microbial cells ay pinakawalan.
	Taas	Pinagsama ang muling paggawa ng lahat ng mga bahagi at istraktura ng cellular, na humahantong sa isang pagtaas sa masa ng cell
	Pagpaparami	Taasan ang bilang ng mga cell sa populasyon
	Lumalagong sa nutrient media.	Sa mga kondisyon sa laboratoryo, ang mga mikroorganismo ay lumago sa nutrient media na dapat na isterilis, transparent, basa-basa, naglalaman ng ilang mga nutrisyon (protina, karbohidrat, bitamina, elemento ng pagsubaybay, atbp.)

Talahanayan 1.1 Komposisyon ng kemikal at mga pagpapaandar ng pisyolohikal ng mga elemento.

№	Elemento ng komposisyon		Mga katangian at papel sa pisyolohiya ng cell.
	Tubig	Ang pangunahing bahagi ng isang bacterial cell, na tinatayang halos 80% ng masa nito. Ito ay nasa isang malaya o nakatali na estado na may mga elemento ng istruktura ng cell. Sa mga pagtatalo, ang dami ng tubig ay nabawasan sa 18.20%. Ang tubig ay isang solvent para sa maraming mga sangkap at gumaganap din ng isang mekanikal na papel sa pagbibigay turgor. Sa panahon ng plasmolysis - ang pagkawala ng tubig ng cell sa isang hypertonic solution - ang protoplasm ay hiwalay mula sa lamad ng cell. Ang pagtanggal ng tubig mula sa cell, pagpapatayo, suspindihin ang mga proseso ng metabolic. Karamihan sa mga mikroorganismo ay pinahihintulutan ang pagpapatayo nang maayos. Sa kakulangan ng tubig, ang mga mikroorganismo ay hindi dumami. Ang pagpapatayo ng vacuum mula sa isang nakapirming estado (lyophilization) ay tumitigil sa pagpaparami at nagtataguyod ng pangmatagalang pangangalaga ng mga indibidwal na microbial.
	Protina	40 - 80% tuyong bagay. Natutukoy nila ang pinakamahalagang biological na katangian ng bakterya at karaniwang binubuo ng mga kumbinasyon ng 20 amino acid. Kasama sa bakterya ang diaminopimelic acid (DAP), na wala sa mga selula ng tao at hayop. Naglalaman ang bakterya ng higit sa 2000 iba't ibang mga protina na matatagpuan sa mga sangkap ng istruktura at kasangkot sa mga proseso ng metabolic. Karamihan sa mga protina ay may aktibidad na enzymatic.Natutukoy ng mga protina ng bacterial cell ang antigenicity at immunogenicity, virulence, at species ng bacteria.
№	Elemento ng komposisyon	Mga katangian at papel sa pisyolohiya ng cell.
	Nucleic acid	Gumagawa sila ng mga pag-andar na katulad ng mga nucleic acid ng eukaryotic cells: ang isang molekula ng DNA sa anyo ng isang chromosome ay responsable para sa pagmamana, ang mga ribonucleic acid (impormasyon, o matrix, transportasyon at ribosomal) ay kasangkot sa protein biosynthesis.
	Mga Karbohidrat	Kinakatawan sila ng mga simpleng sangkap (mono- at disaccharides) at mga kumplikadong compound. Ang mga polysaccharide ay madalas na matatagpuan sa mga kapsula. Ang ilang mga intracellular polysaccharides (starch, glycogen, atbp.) Ay mga nakareserba na nutrisyon.
	Mga lipid	Bahagi sila ng cytoplasmic membrane at mga derivatives nito, pati na rin ang cell wall ng bacteria, halimbawa, ang panlabas na lamad, kung saan, bilang karagdagan sa biomolecular layer ng lipids, mayroong LPS. Maaaring gampanan ng lipids ang papel na ginagampanan ng mga nakareserba na sustansya sa cytoplasm. Ang mga bakterya lipid ay kinakatawan ng mga phospholipids, fatty acid at glycerides. Naglalaman ang Mycobacterium tuberculosis ng pinakamalaking dami ng lipid (hanggang 40%).
	Mga Mineral	Natagpuan sa abo pagkatapos masunog ang mga cell. Ang posporus, potasa, sosa, asupre, iron, kaltsyum, magnesiyo, pati na rin ang mga elemento ng pagsubaybay (sink, tanso, kobalt, barium, mangganeso, atbp.) Ay napansin sa maraming dami. Kasangkot ang mga ito sa pagsasaayos ng osmotic pressure, pH ng daluyan, potensyal na redox, buhayin ang mga enzyme, ay bahagi ng mga enzyme, bitamina at istruktura na bahagi ng microbial cell.

Talahanayan 1.2. Mga base ng nitrogenous.

№	Mga base ng nitrogenous	Katangian	Tandaan
	Purine	Adenine, Guanine	Komposisyon ng Nucleotide: deoxyribose, nitrogenous base - adenine, guanine, cytosine, thymine, H3PO4 residue. Pagkumpleto ng mga nitrogenous base A = T, G = C. Dobleng helix. May kakayahang pagdoble ng sarili
	Pyrimidine	Cytosine, Timin o Uracil (para sa RNA sa halip na Timin)

Talahanayan 1.2.1 Mga Enzim

№	Tanda	Katangian
	Kahulugan	Tukoy at mabisa ang mga catalista ng protina na naroroon sa lahat ng nabubuhay na mga cell.
	Mga pagpapaandar	Binabawasan ng mga enzim ang enerhiya ng pagsasaaktibo, na nagbibigay ng paglitaw ng naturang mga reaksyong kemikal na, nang wala ang mga ito, ay magaganap lamang sa mataas na temperatura, labis na presyon at sa ilalim ng iba pang mga kondisyong hindi pang-pisyolohikal na hindi katanggap-tanggap para sa isang buhay na cell.
		Taasan ng mga enzim ang rate ng reaksyon ng halos 10 mga order ng lakas, na binabawasan ang kalahating buhay ng anumang reaksyon mula 300 taon hanggang isang segundo.
		"Kinikilala" ng mga enzim ang substrate ng spatial na pag-aayos ng molekula nito at ang pamamahagi ng mga singil dito. Ang isang tiyak na bahagi ng enzymatic protein Molekyul - ang catalytic center - ay responsable para sa pagbubuklod sa substrate. Sa kasong ito, nabuo ang isang intermediate na enzyme-substrate complex, na pagkatapos ay mabulok sa pagbuo ng isang reaksyon na produkto at isang libreng enzyme.
	Mga pagkakaiba-iba	Ang regulasyon (allosteric) na mga enzyme ay nakikita ang iba't ibang mga metabolic signal at, alinsunod sa mga ito, binabago ang kanilang aktibidad na catalytic.	Mga epektong enzyme - mga enzyme na nagpapasara sa ilang mga reaksyon (para sa karagdagang detalye, tingnan ang Talahanayan 1.2.2.)
	Functional na aktibidad	Ang aktibidad ng aktibidad ng mga enzyme at ang rate ng mga reaksyon ng enzymatic ay nakasalalay sa mga kundisyon kung saan matatagpuan ang microorganism at, una sa lahat, sa temperatura ng daluyan at ng pH nito. Para sa maraming mga pathogenic microorganism, ang pinakamainam na temperatura ay 37 ° C at PH 7.2-7.4.

ENZYME CLASSES:

• synthesize ng mga mikroorganismo ang iba't ibang mga enzyme na kabilang sa lahat ng anim na kilalang klase.

Talahanayan 1.2.2. Mga klase ng effector enzymes

№	Enzyme class	Nag-catalyze:
	Oxidoreductase	Paglipat ng elektron
	Mga paglipat	Paglipat ng iba't ibang mga pangkat ng kemikal
	Mga hydrolase	Paglipat ng mga gumaganang pangkat sa isang water Molekyul
	Mga Lyases	Pagkakabit ng mga pangkat sa dobleng bono at mga reaksyon ng pag-reverse
	Isomerase	Paglipat ng mga pangkat sa loob ng isang molekula na may pagbuo ng mga isomeric form
	Ligases	Pagbuo ng mga C-C, C-S, C-O, C-N na bono dahil sa mga reaksyon ng paghalay na nauugnay sa agnas ng adenosine triphosphate (ATP)

Talahanayan 1.2.3. Mga uri ng mga enzyme sa pamamagitan ng pagbuo sa isang bacterial cell

№	Uri ng	Katangian	Mga Tala (i-edit)
	Iiducible (adaptive) mga enzyme "Induction ng substrate"	Ang mga enzim, ang konsentrasyon na kung saan sa cell ay tumataas nang matindi bilang tugon sa hitsura ng isang inducer substrate sa daluyan. Ang mga ito ay na-synthesize ng isang bacterial cell lamang kung mayroong isang substrate ng enzyme na ito sa daluyan
	Mga nakakapigil na enzyme	Ang pagbubuo ng mga enzyme na ito ay pinigilan bilang isang resulta ng labis na akumulasyon ng reaksyon na produkto na na-catalyze ng enzyme na ito.	Ang isang halimbawa ng pagpigil sa enzyme ay ang pagbubuo ng tryptophan, na nabuo mula sa anthranilic acid na may paglahok ng anthranilate synthetase.
	Mga nagpapatuloy na mga enzyme	Ang mga enzim ay na-synthesize anuman ang mga kondisyon sa kapaligiran	Mga glycolysis enzyme
	Mga kumplikadong Multienzyme	Ang mga intracellular na enzyme ay pinagsama sa istruktura at pagpapaandar	Ang mga respiratory enzim na kadena na naisalokal sa cytoplasmic membrane.

Talahanayan 1.2.4. Tiyak na mga enzyme

№	Mga enzim	Pagkilala sa bakterya
	Superoxide dismutase at catalase	Ang lahat ng mga aerobes o facultative anaerobes ay nagtataglay ng superoxide dismutase at catalase - mga enzyme na nagpoprotekta sa cell mula sa mga nakakalason na produkto ng metabolismo ng oxygen. Halos lahat ng obligadong anaerobes ay hindi synthesize ang mga enzymes. Isang pangkat lamang ng aerobic bacteria - lactic acid bacteria ang catalase-negative.
	Peroxidase	Ang bakterya ng lactic acid ay nakakaipon ng peroxidase - isang enzyme na nagpapasimula sa oksihenasyon ng mga organikong compound sa ilalim ng pagkilos ng H2O2 (nabawasan sa tubig).
	Arginine dihydrolase	Isang tampok na diagnostic na nakikilala ang mga species ng saprophytic Pseudomonas mula sa mga fittopathogenic.
	Ureaza	Kabilang sa limang pangunahing mga grupo ng pamilya Enterobacteriaceae, dalawa lamang - Escherichiae at Erwiniae - ang hindi synthesize urease.

Talahanayan 1.2.5. Paglalapat ng mga bakterya na enzyme sa pang-industriya na microbiology.

№	Mga enzim	Paglalapat
	Amylase, cellulase, protease, lipase	Upang mapabuti ang pantunaw, ginagamit ang mga nakahandang paghahanda ng mga enzyme na nagpapadali sa hydrolysis ng starch, cellulose, protein at lipids, ayon sa pagkakabanggit.
	Lebadura invertase	Sa paggawa ng mga Matamis upang maiwasan ang pagkikristal ng sukrosa
	Pektinase	Ginamit upang linawin ang mga fruit juice
	Collagenase ng clostridium at streptokinase ng streptococci	Nag-hydrolyze ang mga protina, nagtataguyod ng paggaling ng mga sugat at paso
	Lytic enzymes ng bakterya	Ang mga ito ay nai-sekreto sa kapaligiran, kumilos sa mga dingding ng cell ng mga pathogenic microorganism at nagsisilbing isang mabisang paraan sa paglaban sa huli, kahit na maraming resistensya ng antibiotic
	Ribonucleases, deoxyribonucleases, polymerases, DNA ligases at iba pang mga enzyme na partikular na nagbabago ng mga nucleic acid	Ginamit bilang isang toolkit sa bioorganic chemistry, genetic engineering at gen therapy

Talahanayan 1.2.6. Pag-uuri ng mga enzyme sa pamamagitan ng lokalisasyon.

№	Klase	Lokalisasyon	Mga pagpapaandar
	Endozymes	Sa cytoplasm Sa cytoplasmic membrane Sa periplasmic space	Gumagana lamang sila sa loob ng cell. Catalyze nila ang mga reaksyon ng biosynthesis at metabolismo ng enerhiya.
	Exozymes	Ay inilabas sa kapaligiran.	Ang mga ito ay inilabas ng cell sa kapaligiran at napasasadya ang mga reaksyon ng hydrolysis ng mga kumplikadong mga organikong compound sa mas simple na mga magagamit para sa paglagom ng microbial cell. Kasama rito ang mga hydrolytic enzyme, na may mahalagang papel sa nutrisyon ng mga mikroorganismo.

Talahanayan 1.2.7.Mga enzim ng pathogenic microbes (mga enzyme ng pagsalakay)

№	Mga enzim	Pag-andar	Ang pagbuo ng ilang mga enzyme sa laboratoryo
	Lecitovitellase = lecithinase	Sinisira ang mga lamad ng cell	Paghahasik ng materyal na pagsubok sa medium na nakapagpapalusog ng YSA Resulta: isang maulap na lugar sa paligid ng mga kolonya sa JSA.
	Hemolysin	Sinisira ang mga pulang selula ng dugo	Paghahasik ng materyal na pagsubok sa isang medium ng nutrient na agar ng dugo. Resulta: isang kumpletong hemolysis zone sa paligid ng mga kolonya sa agar ng dugo.
	Mga kultura na positibo sa Coagulase	Nagiging sanhi ng pamumuo ng plasma ng dugo	Ang inokulasyon ng materyal na pagsubok sa sterile citrated plasma ng dugo. Resulta: pagbuo ng plasma
	Mga kultura ng negatibong Coagulase	Paggawa ng Mannitol	Ang paghahasik ng mannitol sa isang medium na nakapagpapalusog sa ilalim ng mga kondisyon ng anaerobic. Resulta: Ang hitsura ng mga may kulay na mga kolonya (sa kulay ng tagapagpahiwatig)
№	Mga enzim	Pag-andar	Ang pagbuo ng ilang mga enzyme sa laboratoryo
	Hyaluronidase	Hydrolyzes hyaluronic acid - ang pangunahing bahagi ng nag-uugnay na tisyu	Paghahasik ng materyal na pagsubok sa isang medium na nakapagpalusog na naglalaman ng hyaluronic acid. Resulta: walang pagbuo ng namu na nangyayari sa mga tubo na naglalaman ng hyaluronidase.
	Neuraminidase	Inaalis nito ang sialic (neuraminic) acid mula sa iba't ibang glycoproteins, glycolipids, polysaccharides, pagdaragdag ng pagkamatagusin ng iba't ibang mga tisyu.	Pagtuklas: reaksyon para sa pagpapasiya ng mga antibodies sa neuraminidase (RINA) at iba pa (immunodiffusion, immunoenzymatic at radioimmune na pamamaraan).

Talahanayan 1.2.8. Pag-uuri ng mga enzyme ayon sa mga katangian ng biochemical.

№	Mga enzim	Pag-andar	Pagtuklas
	Sugarolytic	Pagkasira ng asukal	Pagkakaiba - mga kapaligiran sa diagnostic tulad ng kapaligiran ni Giss, kapaligiran ni Olkenitsky, kapaligiran ni Endo, kapaligiran ni Levin, kapaligiran ni Ploskirev.
	Proteolytic	Pagkasira ng protina	Ang mga microbes ay inoculated na may isang iniksyon sa isang haligi ng gelatin, at pagkatapos ng 3-5 araw ng pagpapapisa sa temperatura ng kuwarto, nabanggit ang katangian ng gelatin liquefaction. Ang aktibidad ng protolytictic ay natutukoy din sa pamamagitan ng pagbuo ng mga produkto ng agnas ng protina: indole, hydrogen sulfide, ammonia. Upang matukoy ang mga ito, ang mga mikroorganismo ay inoculated sa sabaw ng karne-peptone.
	Mga end-product na enzyme	Pagbuo ng Alkali Pagbuo ng acid Pagbubuo ng hydrogen sulfide Pagbuo ng amonia, atbp.	Upang makilala ang ilang mga uri ng bakterya mula sa iba batay sa kanilang aktibidad na enzymatic, ginagamit ang mga itopagkakaiba-iba ng mga kapaligiran sa diagnostic

Scheme 1.2.8. Komposisyon ng enzim.

ENZYMIC CompOSITION NG ANUMANG MICROORGANISM:

Natukoy ng genome nito

Ay isang matatag na pag-sign

Malawakang ginagamit upang makilala ang mga ito

Pagtukoy ng saccharolytic, proteolytic at iba pang mga katangian.

Talahanayan 1.3. Mga pigment

№	Mga pigment	Pagbubuo ng microorganism
	Nalulusaw sa taba na mga carotenoid na pigment na pula, kulay kahel o dilaw	Bumuo ng mga sarcins, mycobacterium tuberculosis, ilang mga actinomycetes. Pinoprotektahan ng mga pigment na ito ang mga ito mula sa mga sinag ng UV.
	Itim o kayumanggi pigment - melanins	Na-synthesize ng obligate anaerobes Bacteroides niger at iba pa, hindi matutunaw sa tubig at kahit na malakas na acid
	Maliwanag na pulang pigment ng pyrrole - prodigiosin	Binuo ng ilang mga serasyon
	Natutunaw na tubig na phenosine pigment - pyocyanin.	Ginawa ng Pseudomonas aeruginosa bacteria (Pseudomonas aeruginosa). Sa kasong ito, ang daluyan ng kultura na may isang walang kinikilingan o alkalina na pH ay nagiging asul-berde.

Talahanayan 1.4. Luminous at aroma-bumubuo ng mga mikroorganismo

№	Kababalaghan	Kalagayan at katangian
	Glow (luminescence)	Ang bakterya ay sanhi ng luminescence ng mga substrates na iyon, halimbawa, kaliskis ng isda, mas mataas na fungi, nabubulok na mga puno, mga produktong pagkain, sa ibabaw na kung saan dumami sila.Karamihan sa luminescent bacteria ay mga halophilic species na maaaring dumami sa mataas na konsentrasyon ng asin. Nakatira sila sa mga dagat at karagatan at bihira sa mga sariwang tubig na tubig. Lahat ng luminescent bacteria ay aerobic. Ang mekanismo ng luminescence ay nauugnay sa paglabas ng enerhiya sa panahon ng biological oxidation ng substrate.
	Pagbuo ng aroma	Ang ilang mga mikroorganismo ay gumagawa ng pabagu-bago ng mabangong mga sangkap, tulad ng ethyl acetate at amyl acetic esters, na nagbibigay ng aroma sa alak, serbesa, lactic acid at iba pang mga produktong pagkain, at samakatuwid ay ginagamit sa kanilang paggawa.

Talahanayan 2.1.1 Metabolism

№	Konsepto	Kahulugan
	Metabolismo	Ang mga proseso ng biochemical sa cell ay pinag-isa ng isang salita - metabolismo (Greek metabole - transformation). Ang katagang ito ay katumbas ng konsepto ng "metabolismo at enerhiya". Mayroong dalawang aspeto ng metabolismo: anabolism at catabolism.
		Ang Anabolism ay isang hanay ng mga reaksyon ng biochemical na nagbubuo ng mga bahagi ng cell, iyon ay, ang panig ng metabolismo, na tinatawag na nakabubuo na metabolismo.	Ang Catabolism ay isang hanay ng mga reaksyon na nagbibigay ng cell na may enerhiya na kinakailangan, lalo na, para sa mga reaksyon ng nakabubuo na metabolismo. Samakatuwid, ang catabolism ay tinukoy din bilang metabolismo ng enerhiya ng cell.
	Amphibolism	Ang panggitna metabolismo, na kung saan ay nagko-convert ng mababang mga bahagi ng molekular na timbang ng mga sustansya sa isang bilang ng mga organikong asido at posporiko na ester, ay tinatawag na

Scheme 2.1.1. Metabolismo

METABOLISM -

isang hanay ng dalawang kabaligtaran, ngunit magkakaugnay na proseso: catabolism at anabolism

kasama si

Anabolismo= assimilation = plastic metabolism = nakabubuo na metabolismo

Catabolism= dissimilation = enerhiya metabolismo = pagkabulok = pagbibigay ng cell ng enerhiya

Pagbubuo (ng mga bahagi ng cell)

Enzymatic catabolic reaksyon na nagreresulta sa paglabas ng enerhiya, na naipon sa mga molekulang ATP.

Biosynthesis ng monomer:

amino acid nucleotides monosaccharides ng fatty acid

Biosintesis ng Polymer:

mga protina ng nucleic acid, lipid polysaccharides

Bilang isang resulta ng mga reaksyon ng anabolic na enzymatic, ang enerhiya na inilabas sa proseso ng catabolism ay ginugol sa pagbubuo ng macromolecules ng mga organikong compound, kung saan pagkatapos ay tipunin ang mga biopolymer - ang mga bahagi ng microbial cell.

Ang enerhiya ay ginugol sa pagbubuo ng mga bahagi ng cell

Talahanayan 2.1.3. Metabolismo at pagbabago ng enerhiya ng cell.

№	Metabolismo	Katangian	Mga Tala (i-edit)
	Pag-andar	Nagbibigay ang metabolismo ng isang pabuong balanse na likas sa isang nabubuhay na organismo bilang isang sistema, kung saan ang pagbubuo at pagkawasak, pagpaparami at kamatayan ay magkapantay na balanseng.	Ang metabolismo ay ang pangunahing tanda ng buhay
	Palitan ng plastik Pagbubuo ng mga protina, taba, karbohidrat.	Ito ay isang hanay ng mga reaksyon ng biological synthesis.	Mula sa mga sangkap na pumapasok sa cell mula sa labas, nabuo ang mga molekula, katulad ng mga cell compound, iyon ay, nangyayari ang paglagom.
	Palitan ng enerhiya pagkabulok	Ang kabaligtaran na proseso sa pagbubuo. Ito ay isang koleksyon ng mga reaksyon ng cleavage.	Kapag nahati ang mga high-molekular compound, pinakawalan ang enerhiya, na kinakailangan para sa reaksyon ng biosynthesis, iyon ay, nangyayari ang disimilation. Kapag nasira ang glucose, ang enerhiya ay inilalabas sa mga yugto na may paglahok ng isang bilang ng mga enzyme.

Talahanayan 2.1.2. Pagkakaiba sa metabolismo para sa pagkilala.

№	Mga pagpipilian
	Ang kakayahang magamit ang iba't ibang mga sangkap bilang isang mapagkukunan ng carbon.
	Ang kakayahang bumuo ng mga tiyak na produkto ng pagtatapos bilang isang resulta ng agnas ng mga substrates.
	Ang kakayahang ihalo ang ph ng medium ng paglilinang sa acidic o alkalina na bahagi.Ang metabolismo ng karamihan sa mga bakterya ay isinasagawa sa pamamagitan ng mga reaksyong biokimikal ng agnas ng mga sangkap na organikong (mas madalas na hindi organiko) at ang pagbubuo ng mga bahagi ng bakterya na cell mula sa mga simpleng compound na naglalaman ng carbon.

Talahanayan 2.2 Anabolism (nakabubuo na metabolismo)

№	Pangkat ng reaksyon ng anabolic	Naka-synthesize:
	Biosynthesis ng mga monomer	Amino acid, nucleotides, monosaccharides, fatty acid
	Biosintesis ng Polymer	Mga protina, nucleic acid, polysaccharides at lipid

Scheme 2.2.2. Biosynthesis ng mga amino acid sa prokaryotes.

May-akda - L.B. Borisov, p. 52 "Medical Microbiology"

Scheme 2.2.1. Biosynthesis ng mga karbohidrat sa mga mikroorganismo.

May-akda - L.B. Borisov, p. 51 "Medical Microbiology"

Larawan 2.2.3. Lipid biosynthesis

Talahanayan 2.2.4. Mga yugto ng metabolismo ng enerhiya - Catabolism.

№	Mga yugto	Katangian	Tandaan
	Paghahanda	Ang mga Molecule ng disaccharides at polysaccharides, mga protina ay nahahati sa maliit na mga molekula - glucose, glycerin at fatty acid, amino acid. Malaking mga molekula ng nucleic acid bawat nucleotide.	Sa yugtong ito, isang maliit na halaga ng enerhiya ang pinakawalan, na nawala sa anyo ng init.
	Anoxic o hindi kumpleto o anaerobic o fermented o dissimilated.	Ang mga sangkap na nabuo sa yugtong ito sa paglahok ng mga enzyme ay karagdagang nadepreso. Halimbawa: Ang glucose ay nasisira sa dalawang molekula ng lactic acid at dalawang molekula ng ATP.	Ang ATP at H3PO4 ay kasangkot sa mga reaksyon ng glucose cleavage. Sa panahon ng oxygen-free na pagkasira ng glucose, 40% ng enerhiya ay nakaimbak sa ATP Molekyul sa anyo ng isang bono ng kemikal, ang natitira ay nawala sa anyo ng init. Sa lahat ng mga kaso ng pagkasira ng isang glucose molekula, nabuo ang dalawang mga molekulang ATP.
	Ang yugto ng paghinga ng aerobic o pagkasira ng oxygen.	Kapag ang oxygen ay magagamit sa cell, ang mga sangkap na nabuo sa nakaraang yugto ay na-oxidize (nasira) sa mga huling produktoCO at HO.	Ang kabuuang equation ng aerobic respiration:

Scheme 2.2.4. Pagbuburo.

Fermentation metabolism -nailalarawan sa pamamagitan ng pagbuo ng ATP sa pamamagitan ng phosphorylation ng mga substrates.

1. Una (oksihenasyon) = cleavage

2. Pangalawa (pagbawi)

May kasamang pagbabago ng glucose sa pyruvic acid.

May kasamang pagbawi ng hydrogen para sa pagbawi ng pyruvic acid.

Mga landas para sa pagbuo ng pyruvic acid mula sa mga karbohidrat

Scheme 2.2.5. Pyruvic acid.

Glycolytic pathway (Embden-Meyerhof-Parnassus pathway)

Path ng Entner-Dudorov

Pentose pospeyt na landas

Talahanayan 2.2.5. Pagbuburo.

№	Uri ng pagbuburo	Mga Kinatawan	Pangwakas na produkto	Mga Tala (i-edit)
	Lactic acid	Streptococcus Bifidobacterium Lactobacterium	Bumubuo ng lactic acid mula sa pyruvate	Sa ilang mga kaso (homoferment fermentation) lactic acid lamang ang nabuo, sa iba rin mga by-product.
	Formic acid	Enterobacteriaceae	Ang formic acid ay isa sa mga end na produkto. (kasama ang kanyang - tagiliran)	Ang ilang enterobacteriaceae ay sumisira ng formic acid sa H2 at CO2 /
	Butyric acid	Clostridium	Butyric acid at mga by-product	Ang ilang mga uri ng clostridia, kasama ang butyric at iba pang mga acid, bumubuo ng butanol, acetone, atbp. (Pagkatapos ay tinatawag itong acetone-butyl fermentation).
	Propionic acid	Propionobacterium	Bumubuo ng propionic acid mula sa pyruvate	Maraming bakterya ang nagpapalaki ng mga karbohidrat kasama ang iba pang mga pagkain upang mabuo ang etil alkohol. Gayunpaman, hindi ito isang pangunahing produkto.

Talahanayan 2.3.1. Sistema ng pagbubuo ng protina, pagpapalitan ng ion.

№	Pangalan ng item	Katangian
	Mga subosito ng Ribosomal 30S at 50S	Sa kaso ng mga ribosome ng 70S ng bakterya, ang 50S subunit ay naglalaman ng 23S rRNA (~ 3000 nucleotides ang haba) at ang 30S subunit ay naglalaman ng 16S rRNA (~ 1500 na mga nucleotide ang haba); ang malaking ribosomal subunit, bilang karagdagan sa "mahabang" rRNA, naglalaman din ng isa o dalawang "maikling" rRNAs (5S rRNA ng mga bacterial ribosomal subunits 50S o 5S at 5.8S rRNA ng malalaking ribosomal subunits ng eukaryotes). (Para sa karagdagang detalye, tingnan ang Larawan 2.3.1.)
	Messenger RNA (mRNA)	Ang RNA na naglalaman ng impormasyon tungkol sa pangunahing istraktura (pagkakasunud-sunod ng amino acid) ng mga protina
	Isang kumpletong hanay ng dalawampung aminoacyl-tRNAs, para sa pagbuo kung saan kinakailangan ang kaukulang mga amino acid, aminoacyl-tRNA synthetases, tRNA at ATP	Ito ay isang amino acid na sisingilin ng enerhiya at nakasalalay sa tRNA, handa nang maihatid sa ribosome at isama sa polypeptide na synthesize dito.
	Transport RNA (tRNA)	Ang Ribonucleic acid, ang pag-andar nito ay upang magdala ng mga amino acid sa lugar ng synthesis ng protina.
	Mga kadahilanan sa pagsisimula ng protina	(sa mga prokaryote - IF-1, IF-2, IF-3) Nakuha nila ang kanilang pangalan sapagkat kasangkot sila sa samahan ng isang aktibong kumplikadong (708-complex) na 30S at 50S na mga subunits, mRNA at nagpasimulang aminoacyl-tRNA (sa prokaryotes - formylmethionyl -tRNA), na "nagsisimula" (pinasimulan) ang gawain ng ribosomes - ang pagsasalin ng mRNA.
	Mga kadahilanan ng pagpahaba ng protina	(sa prokaryotes - EF-Tu, EF-Ts, EF-G) Sumali sa pagpahaba (pagpahaba) ng synthesized polypeptide chain (peptidil). Ang mga kadahilanan sa paglabas ng protina (RF) ay nagbibigay ng paghihiwalay sa tukoy na codon ng polypeptide mula sa ribosome at ang pagwawakas ng synthes ng protina.
№	Pangalan ng item	Katangian
	Mga kadahilanan sa pagwawakas ng protina	(sa mga prokaryote - RF-1, RF-2, RF-3)
	Ang ilang iba pang mga kadahilanan ng protina (mga asosasyon, paghiwalay ng mga subunit, paglabas, atbp.).	Kinakailangan ang mga salik ng pagsasalin ng protina para sa paggana ng system
	Guanosine Triphosphate (GTP)	Para sa pag-broadcast, kinakailangan ang pakikilahok ng GTF. Ang pangangailangan ng system ng synthesizing ng protina para sa GTP ay napaka tiyak: hindi ito maaaring mapalitan ng alinman sa iba pang mga triphosphates. Ang cell ay gumastos ng mas maraming enerhiya sa protein biosynthesis kaysa sa synthesis ng anumang iba pang biopolymer. Ang pagbuo ng bawat bagong bono ng peptide ay nangangailangan ng cleavage ng apat na mataas na enerhiya na bono (ATP at GTP): dalawa upang mai-load ang tRNA Molekyul na may isang amino acid, at dalawa pa sa panahon ng pagpahaba - isa habang umiiral ang aa-tRNA at ang iba pa sa panahon ng paglipat.
	Ang mga organikong cation sa isang tiyak na konsentrasyon.	Upang mapanatili ang ph ng system sa loob ng mga limitasyong pisyolohikal. Ang mga ion ng amonium ay ginagamit ng ilang mga bakterya upang ma-synthesize ang mga amino acid, ang mga potassium ions ay ginagamit upang itali ang tRNA sa mga ribosome. Ginagawa ng iron at magnesium ions ang papel ng isang cofactor sa isang bilang ng mga proseso ng enzymatic

Larawan 2.3.1. Paglalarawan ng iskema ng mga istraktura ng prokaryotic at eukaryotic ribosome.

May-akda - Korotyaev, p. 68 "Medical Microbiology"

Talahanayan 2.3.2. Mga tampok ng ion exchange sa bacteria.

№	Kakayahan	Nailalarawan ni:
	Mataas na osmotic pressure	Dahil sa makabuluhang intracellular na konsentrasyon ng mga potassium ions sa bakterya, pinananatili ang isang mataas na osmotic pressure.
	Pag-inom ng bakal	Para sa isang bilang ng mga pathogenic at oportunistikong bakterya (Escherichia, Shigella, atbp.), Ang pagkonsumo ng iron sa katawan ng host ay mahirap dahil sa pagkasira nito sa mga walang kinikilingan at bahagyang alkaline na halaga ng PH.	Siderophores -mga espesyal na sangkap na, sa pamamagitan ng nagbigkid na bakal, ginagawa itong matutunaw at madala.
	Asimilasyon	Ang bakterya ay aktibong pumapasok sa SO2 / at PO34 + mga anion mula sa kapaligiran para sa pagbubuo ng mga compound na naglalaman ng mga elementong ito (naglalaman ng asupre na mga amino acid, phospholipids, atbp.).
	Si Jonas	Para sa paglaki at pagpaparami ng bakterya, kinakailangan ang mga compound ng mineral - ions NH4 +, K +, Mg2 +, atbp. (Para sa karagdagang detalye, tingnan ang Talahanayan 2.3.1.)

Talahanayan 2.3.3. Pagpapalit ng Ion

№	Pangalan ng mga compound ng mineral	Pag-andar
	NH4 + (mga ammonium ions)	Ginamit ng ilang mga bakterya upang synthesize amino acid
	K + (potassium ions)	Ginamit upang itali ang t-RNA sa mga ribosome Panatilihin ang mataas na osmotic pressure
	Fe2 + (iron iron)	I-play ang papel ng cofactors sa isang bilang ng mga proseso ng enzymatic Ay isang bahagi ng cytochromes at iba pang mga hemoprotein
	Mg2 + (magnesiyo ions)
	SO42- (sulpate anion)	Kinakailangan para sa pagbubuo ng mga compound na naglalaman ng mga elementong ito (naglalaman ng asupre na mga amino acid, phospholipids, atbp.)
	PO43- (phosphate anion)

Scheme 2.4.1. Metabolismo ng enerhiya.

Para sa pagbubuo, kailangan ng bakterya ...

1. Mga pampalusog

1. Enerhiya

Talahanayan 2.4.1. Energy metabolism (biological oxidation).

№	Proseso	Kinakailangan:
	Pagbubuo ng mga sangkap ng istruktura ng mga microbial cells at pagpapanatili ng mahahalagang proseso	Sapat na dami ng enerhiya. Ang pangangailangan na ito ay natutugunan ng biological oxidation, bilang isang resulta kung saan na-synthesize ang mga molekulang ATP.
	Enerhiya (ATP)	Ang bakteryang bakal ay tumatanggap ng enerhiya na inilabas sa panahon ng kanilang direktang oksihenasyon ng iron (Fe2 + hanggang Fe3 +), na ginagamit upang ayusin ang CO2, ang bakterya na metabolizing sulfur, ay nagbibigay ng lakas sa kanilang sarili dahil sa oksihenasyon ng mga compound na naglalaman ng asupre. Gayunpaman, ang karamihan sa mga prokaryote ay nakakakuha ng enerhiya sa pamamagitan ng pag-aalis ng tubig. Natatanggap din ang enerhiya sa proseso ng paghinga (para sa isang detalyadong talahanayan, tingnan ang kaukulang seksyon).

Scheme 2.4. Biological oxidation sa mga prokaryote.

Agnas ng polymers sa monomer

Yugto ko

Protina

Mga taba

Mga Karbohidrat

glycerin at fatty acid

mga amino acid

monosaccharides

Ang agnas sa ilalim ng anoxic na kondisyon

II yugto

Pagbuo ng mga intermediate na produkto

Ang oksihenasyon sa ilalim ng mga kondisyon ng oxygen sa huling mga produkto

Yugto III

CO2

H2O

Talahanayan 2.4.2. Metabolismo ng enerhiya.

№	Konsepto	Katangian
	Kakanyahan ng Metabolism ng Enerhiya	Ang pagbibigay ng lakas ng mga cell na kinakailangan para sa pagpapakita ng buhay.
	ATF	Ang molekulang ATP ay na-synthesize bilang isang resulta ng paglipat ng isang electron mula sa pangunahing donor nito sa pangwakas na tatanggap.
	Hininga	Ang paghinga ay biological oxidation (pagkasira). Depende sa kung ano ang pangwakas na tumatanggap ng electron, mayroong hininga: Aerobic - sa aerobic respiration, ang molekular oxygen O2 ay nagsisilbing panghuling tumatanggap ng electron. Anaerobic - ang pangwakas na tumatanggap ng electron ay mga inorganic compound: NO3-, SO3-, SO42-
	Pagpapakilos ng enerhiya	Ang enerhiya ay napakilos sa mga reaksyon ng oksihenasyon at pagbawas.
	Reaksyon ng oksihenasyon	Ang kakayahan ng isang sangkap na magbigay ng mga electron (oxidize)
	Reaksyon sa Pagbawi	Ang kakayahan ng isang sangkap na maglakip ng mga electron.
	Potensyal ng Redox	Ang kakayahan ng isang sangkap na magbigay (dami ng expression)

Scheme 2.5. Pagbubuo.

SINTHESIS

mga protina

mataba

karbohidrat

Talahanayan 2.5.1. Pagbubuo

№	Pangalan	Katangian
	Cytoplasm	Ang pagbubuo ng mga paunang produkto ay nangyayari sa cytoplasm.
	Cytoplasmic membrane	Ang mga paunang produkto mula sa cytoplasm ay inililipat sa panlabas na ibabaw ng cytoplasmic membrane.
	Morphogenesis	Sa CPM, nagsisimula ang morphogenesis, iyon ay, ang pagbuo ng mga istraktura ng cell (mga capsule, cell wall, atbp.) Na may pakikilahok ng mga enzyme.

Talahanayan 2.5.1. Pagbubuo

№	Biosynthesis	Ng alin	Mga Tala (i-edit)
Ako	Biosynthesis ng mga karbohidrat	Ang mga autotroph ay nagbubuo ng glucose mula sa CO2. Ang heterotrophs ay nagbubuo ng glucose mula sa mga compound na naglalaman ng carbon.	Ikot ng Calvin (tingnan ang diagram 2.2.1.)
II	Amino acid biosynthesis	Karamihan sa mga prokaryote ay nakapag-synthesize ng lahat ng mga amino acid mula sa: Pyruvate α-ketoglutarate mag-fumorate	Ang mapagkukunan ng enerhiya ay ATP. Ang pyruvate ay nabuo sa glycolytic cycle. Auxotrophic microorganisms - natupok na handa na sa katawan ng host.
III	Lipid biosynthesis	Ang mga lipid ay na-synthesize mula sa mas simpleng mga compound - mga produktong metabolic ng mga protina at karbohidrat	Ang mga protina ng acetyl-transfer ay may mahalagang papel. Auxotrophic microorganisms - ubusin ang nakahanda sa katawan ng host o mula sa nutrient media.

Talahanayan 2.5.2. Ang mga pangunahing yugto ng protein biosynthesis.

№	Mga yugto	Katangian	Mga Tala (i-edit)
	Transcription	Ang proseso ng pagbubuo ng RNA sa mga gen. Ito ang proseso ng muling pagsusulat ng impormasyon mula sa DNA - gene hanggang mRNA - gene.	Isinasagawa ito gamit ang umaasa sa DNA na RNA - polymerase. Ang paglilipat ng impormasyon tungkol sa istraktura ng protina sa ribosome ay nangyayari sa tulong ng mRNA.
	Pag-broadcast (paghahatid)	Ang proseso ng sariling protina biosynthesis. Ang proseso ng pag-decode ng genetic code sa mRNA at pagpapatupad nito sa anyo ng isang kadena ng polypeptide.	Dahil ang bawat codon ay naglalaman ng tatlong mga nucleotide, ang parehong teksto ng genetiko ay maaaring mabasa sa tatlong magkakaibang paraan (simula sa una, pangalawa at pangatlong mga nucleotide), iyon ay, sa tatlong magkakaibang mga frame ng pagbabasa.

• Tandaan sa talahanayan: Ang pangunahing istraktura ng bawat protina ay ang pagkakasunud-sunod ng mga amino acid dito.

Scheme 2.5.2. Ang mga chain ng paglipat ng elektron mula sa pangunahing nagbibigay ng hydrogen (electron) patungo sa huling tatanggap na O2.

Organikong bagay

(pangunahing donor ng electron)

NAD (- 0.32)

Flavoprotein (- 0.20)

Quinone (- 0, 07)

Cytochrome (+0.01)

Cytochrome C (+0.22)

Cytochrome A (+0.34)

O2 (+0.81)

panghuling tumatanggap

Talahanayan 3.1. Pag-uuri ng mga organismo ayon sa mga uri ng pagkain.

№	Elementong organogeniko	Mga uri ng pagkain	Katangian
	Carbon (C)	Mga Autotroph	Sila mismo ang nag-synthesize ng lahat ng mga sangkap na naglalaman ng carbon ng cell mula sa CO2.
		Mga heterotroph	Hindi nila nasiyahan ang kanilang mga pangangailangan sa CO2, gumagamit sila ng mga nakahandang organikong compound.
		Saprophytes	Ang mapagkukunan ng pagkain ay patay na mga organikong substrate.
		Mga Parasite	Ang mapagkukunan ng pagkain ay mga nabubuhay na tisyu ng mga hayop at halaman.
	Nitrogen (N)	Prototrophs	Masisiyahan ang kanilang mga pangangailangan sa atmospheric at mineral nitrogen
		Auxotrophs	Kailangan mo ng mga nakahandang organikong nitrogenous compound.
	Hydrogen (H)	Ang pangunahing mapagkukunan ay H2O
	Oxygen (O)

Talahanayan 3.1.2. Pagbabago ng enerhiya

№	Pag-uuri	Pangalan	Kailangan:
	Sa pamamagitan ng mapagkukunan ng enerhiya	Phototrophs	sikat ng araw
		Mga Chemotroph	Mga reaksyon ng Redox
	Sa pamamagitan ng electron donor	Lithotrophs	Mga hindi organikong compound (H2, H2S, NH3, Fe, atbp.)
		Mga Organotroph	Mga organikong compound

Talahanayan 3.1.3. Mga pamamaraan sa pagpapakain ng carbon

№	Pinagmulan ng enerhiya	Nagbibigay ng elektron	Paraan ng pagpapakain ng carbon
	Enerhiya ng sikat ng araw	Mga hindi organikong compound	Photolithoheterotrophs
		Mga organikong compound	Photoorganoheterotrophs
	Mga reaksyon ng Redox	Mga hindi organikong compound	Chemolithoheterotrophs
		Mga organikong compound	Chemoorganoheterotrophs

Talahanayan 3.2. Mga mekanismo ng kuryente:

№	Mekanismo	Mga Kundisyon	Gradient ng konsentrasyon	Mga gastos sa enerhiya	Pagtukoy sa substrate
	Passive diffusion	Ang konsentrasyon ng mga nutrisyon sa daluyan ay lumampas sa konsentrasyon sa cell.	Sa pamamagitan ng gradient ng konsentrasyon	–	–
	Pinadali ang pagsasabog	Ang mga protina ng permease ay kasangkot.	Sa pamamagitan ng gradient ng konsentrasyon	–	+
	Aktibong transportasyon	Ang mga protina ng permease ay kasangkot.	Laban sa gradient ng konsentrasyon	+	+
3A	Paglipat ng mga pangkat ng kemikal	Sa panahon ng proseso ng paglipat, nangyayari ang pagbabago ng kemikal ng mga nutrisyon.	Laban sa gradient ng konsentrasyon	+	+

Talahanayan 3.3. Ang pagdadala ng mga nutrisyon mula sa bacterial cell.

№	Pangalan	Katangian
	Reaksyon ng Phosphotransferase	Nangyayari kapag ang phosphorylation ng inilipat na molekula.
	Sekreto ng pagsasalin	Sa kasong ito, ang mga na-synthesize na molekula ay dapat magkaroon ng isang espesyal na humahantong sa pagkakasunud-sunod ng amino acid upang makabit sa lamad at bumuo ng isang channel kung saan maaaring makatakas ang mga molekulang protina sa kapaligiran. Kaya, ang mga lason ng tetanus, diphtheria at iba pang mga molekula ay pinakawalan mula sa mga cell ng kaukulang bakterya.
	Namumuko ang lamad	Ang mga molekula na nabuo sa cell ay napapaligiran ng isang membrane vesicle, na hiwalay sa kapaligiran.

Talahanayan 4. Paglago.

№	Konsepto	Kahulugan ng konsepto.
	Taas	Isang hindi maibabalik na pagtaas sa dami ng bagay na nabubuhay, kadalasang sanhi ng paghati sa cell.Kung sa mga multicellular na organismo ang isang pagtaas sa laki ng katawan ay karaniwang sinusunod, pagkatapos ay sa mga multicellular na organismo ang bilang ng mga cell ay tumataas. Ngunit kahit na sa bakterya, dapat dagdagan ang pagtaas ng bilang ng mga cell at pagdaragdag ng masa ng cell.
	Mga kadahilanan na nakakaapekto sa paglaki ng bakterya sa vitro.	Culture Media: Synthetic, natural, semi-synthetic (ayon sa pinagmulan) Simple at kumplikado (sa komposisyon) Liquid, siksik, semi-likido (ayon sa pagkakapare-pareho) Cumulative Elektribo, pangunahing, pagkakaiba sa diagnostic (ayon sa layunin) Ang Mycobacterium leprae ay hindi kaya ng in vitro Paglaki ng Chlamydia (kabilang ang mga parasito) Temperatura (pagtaas sa saklaw): Mesophilic bacteria (20-40 ° C) Thermophilic bacteria (50-60 ° C) Psychrophilic (0-10 ° C)
	Pagtatasa ng paglaki ng bakterya	Ang dami ng paglago ay karaniwang isinasagawa sa likidong media kung saan ang lumalaking bakterya ay bumubuo ng isang homogenous na suspensyon. Ang isang pagtaas sa bilang ng mga cell ay itinatag sa pamamagitan ng pagtukoy ng konsentrasyon ng bakterya sa 1 ML, o ang pagtaas ng masa ng cell ay natutukoy sa mga yunit ng timbang bawat dami ng yunit.

Mga kadahilanan ng paglago

Mga lipid

Mga amino acid

Mga bitamina

Mga base ng nitrogenous

Talahanayan 4.1. Mga kadahilanan ng paglago

№		Mga kadahilanan ng paglago	Katangian	Pag-andar
	Mga amino acid		Leucine Tyrosine Arginine	Maraming mga mikroorganismo, lalo na ang bakterya, ay nangangailangan ng isa o higit pang mga amino acid (isa o higit pa), dahil hindi nila ito maaaring i-synthesize ng kanilang sarili. Ang mga mikroorganismo ng ganitong uri ay tinatawag na auxotrophic para sa mga amino acid o iba pang mga compound na hindi nila nagawang synthesize.
	Mga base sa purine at ang kanilang mga derivatives		Nucleotides: Adenine Guanine	Ang mga ito ay mga kadahilanan ng paglaki ng bakterya. Ang ilang mga uri ng mycoplasmas ay nangangailangan ng mga nucleotide. Kinakailangan para sa pagbuo ng mga nucleic acid.
	Mga base ng Pyrimidine at ang kanilang mga derivatives		Mga Nucleotide Cytosine Timin Uracil
№	Mga kadahilanan ng paglago		Katangian	Pag-andar
	Mga lipid		Mga walang kinikilingan na lipid	Bahagi ng mga lamad ng lamad
			Mga pospolipid
			Fatty acid	Ay mga bahagi ng phospholipids
			Glycolipids	Sa mycoplasmas, bahagi sila ng cytoplasmic membrane
			Mga Sterol
	Mga bitamina (pangunahin ang pangkat B)		Thiamin (B1)	Staphylococcus aureus, pneumococcus, Brucella
			Nicotinic acid (B3)	Lahat ng uri ng bacteria na hugis pamalo
			Folic acid (B9)	Bifidobacteria at propionic acid
			Pantothenic Acid (B5)	Ang ilang mga uri ng streptococci, tetanus bacilli
			Biotin (B7)	Bakterya ng lebadura at pag-aayos ng nitrogen na Rhizobium
			Hemes - mga bahagi ng cytochromes	Hemophilic bacteria, mycobacterium tuberculosis

Talahanayan 5. Paghinga.

№	Pangalan	Katangian
	Hininga	Biological oxidation (mga reaksyon ng enzymatic)
	Base	Ang paghinga ay batay sa mga reaksyon ng redox na humahantong sa pagbuo ng ATP, isang unibersal na nagtitipon ng enerhiya ng kemikal.
	Mga proseso	Kapag huminga, ang mga sumusunod na proseso ay nagaganap: Ang oksihenasyon ay ang pagpapalabas ng hydrogen o electron ng mga nagbibigay. Ang reduction ay ang kalakip ng hydrogen o electron sa isang tatanggap.
	Paghinga ng aerobic	Ang pangwakas na tumatanggap ng hydrogen o electron ay molekular oxygen.
	Anaerobic na paghinga	Ang tumatanggap ng hydrogen o electron ay isang inorganic compound - NO3-, SO42-, SO32-.
	Pagbuburo	Ang mga organikong compound ay tumatanggap ng hydrogen o electron.

Talahanayan 5.1. Pag-uuri ng paghinga.

№	Bakterya	Katangian	Mga Tala (i-edit)
	Mahigpit na anaerobes	Nagaganap ang pagpapalitan ng enerhiya nang walang paglahok ng libreng oxygen. Ang pagbubuo ng ATP sa panahon ng pagkonsumo ng glucose sa ilalim ng mga kundisyon ng anaerobic (glycolysis) ay nangyayari dahil sa phosphorylation ng substrate. Ang oxygen para sa anaerobes ay hindi nagsisilbing panghuling tumatanggap ng electron.Bukod dito, ang molekular oxygen ay may nakakalason na epekto sa kanila.	ang mahigpit na anaerobes ay kulang sa enzyme catalase, samakatuwid, naipon sa pagkakaroon ng oxygen, ay may epekto sa bakterya sa kanila; Ang mga mahigpit na anaerobes ay kulang sa isang sistema para sa pagsasaayos ng potensyal na redox (potensyal na redox).
	Mahigpit na aerobes	Makakatanggap lamang sila ng enerhiya sa pamamagitan lamang ng paghinga at samakatuwid kinakailangan na kailangan ng molekular oxygen. Ang mga organismo na tumatanggap ng enerhiya at bumubuo ng ATP na gumagamit lamang ng oxidative phosphorylation ng substrate, kung saan ang molekular oxygen lamang ang maaaring kumilos bilang isang oxidant. Ang paglaki ng karamihan sa mga aerobic bacteria ay humihinto sa konsentrasyon ng oxygen na 40-50% o higit pa.	Ang mahigpit na aerobes ay nagsasama, halimbawa, ng mga kinatawan ng genus na Pseudomonas
№	Bakterya	Katangian	Mga Tala (i-edit)
	Mga Facialative anaerobes	Lumago sa pagkakaroon at kawalan ng molekular oxygen Ang mga organisasyong aerobic ay madalas na naglalaman ng tatlong mga cytochromes, facultative anaerobes - isa o dalawa, ang mga obligadong anaerobes ay hindi naglalaman ng mga cytochromes.	Ang mga facultative anaerobes ay nagsasama ng enterobacteria at maraming mga yeast na maaaring lumipat mula sa paghinga sa pagkakaroon ng O2 hanggang sa pagbuburo sa kawalan ng O2.
	Microaerophiles	Isang microorganism na nangangailangan, kaiba sa mahigpit na anaerobes, ang pagkakaroon ng oxygen sa himpapawid o medium ng nutrient para sa paglago nito, ngunit sa pinababang konsentrasyon kumpara sa nilalaman ng oxygen sa ordinaryong hangin o sa normal na mga tisyu ng katawan ng host (taliwas sa aerobes , para sa paglaki ng kung aling normal na nilalaman ng oxygen sa kapaligiran o medium na nakapagpalusog). Maraming mga microaerophile ay capnophile din, ibig sabihin, nangangailangan sila ng mas mataas na konsentrasyon ng carbon dioxide.	Sa laboratoryo, ang mga naturang organismo ay madaling malinang sa isang "jar ng kandila". Ang isang "jar ng kandila" ay isang lalagyan kung saan ang isang nasusunog na kandila ay ipinakilala bago tinatakan ng isang takip na walang hangin. Ang apoy ng kandila ay masusunog hanggang sa mapapatay ito mula sa isang kakulangan ng oxygen, bilang isang resulta kung saan ang isang kapaligiran na puspos ng carbon dioxide na may isang nabawasan na nilalaman ng oxygen ay nabuo sa lata.

Talahanayan 6. Mga Katangian ng pagpaparami.

№	Pangalan	Katangian
	Pagpaparami	Ang term na "paglaganap" ay tumutukoy sa isang pagtaas sa bilang ng mga cell sa isang populasyon. Karamihan sa mga prokaryote ay nagpaparami sa pamamagitan ng nakahalang paghati, ang ilan sa pamamagitan ng pamumulaklak. Ang fungus ay nagpaparami sa pamamagitan ng sporulation.
	Saan pupunta	Kapag dumarami ang isang microbial cell, ang pinakamahalagang proseso ay nangyayari sa nucleus (nucleoid), na naglalaman ng lahat ng impormasyong genetiko sa isang dobleng straced na molekula ng DNA.

Scheme 6. Pag-asa ng tagal ng henerasyon sa iba`t ibang mga kadahilanan.

Tagal ng henerasyon

Uri ng bakterya

Edad

Populasyon

Temperatura

Ang komposisyon ng nutrient medium

Talahanayan 6.1. Mga yugto ng pagpaparami ng bakterya.

№	Yugto	Katangian
Ako	Paunang yugto ng nakatigil	Tumatagal ng 1-2 oras. Sa yugtong ito, ang bilang ng mga bacterial cell ay hindi tumataas.
II	Lag phase (yugto ng pagkaantala sa pagpaparami)	Ito ay nailalarawan sa pamamagitan ng pagsisimula ng masinsinang paglaki ng cell, ngunit ang rate ng paghahati ng cell ay mananatiling mababa.
III	Pag-log phase (logarithmic)	Iba't ibang sa maximum na rate ng pagpaparami ng cell at isang pagtaas sa bilang ng populasyon ng bakterya na exponentially
IV	Negatibong yugto ng pagpapabilis	Ito ay nailalarawan sa pamamagitan ng isang mas mababang aktibidad ng mga bacterial cell at isang pagpapahaba ng panahon ng henerasyon. Ito ay nangyayari bilang isang resulta ng pag-ubos ng medium ng nutrient, ang akumulasyon ng mga produktong metabolic dito at kakulangan ng oxygen.
V	Nakatigil na yugto	Ito ay nailalarawan sa pamamagitan ng isang balanse sa pagitan ng bilang ng mga patay, bagong nabuo at hindi natutulog na mga cell.
VI	Bahagi ng tadhana	Ito ay nangyayari sa isang pare-pareho na rate at pinalitan ng mga phase ng UP-USH ng pagbawas ng rate ng pagkamatay ng cell.

Scheme 7. Mga kinakailangan para sa culture media.

Mga Kinakailangan

Lapot

Humidity

Kawalan ng gana

Halaga ng nutrisyon

Aninaw

Isotonicity

pH ng kapaligiran

Talahanayan 7. Reproduction ng bacteria sa nutrient media.

№	Nutrisyon medium	Katangian
	Siksik na nutrient media	Sa siksik na nutrient media, ang mga bakterya ay bumubuo ng mga kolonya - mga kumpol ng mga cell.
		S - uri ng (makinis - makinis at makintab) Round, na may pantay na gilid, makinis, matambok.	R - uri ng (magaspang - magaspang, hindi pantay) Hindi regular sa hugis na may jagged edge, magaspang, may pilyo.
	Liquid culture media	Ibong paglaki (latak) Paglago ng ibabaw (pelikula) Paglaki ng diffuse (pare-parehong haze)

Talahanayan 7.1. Pag-uuri ng media ng kultura.

№	Pag-uuri	Mga Panonood	Mga halimbawa ng
	Sa pamamagitan ng komposisyon	Simple	MPA - Meat Peptone Agar BCH - sabaw ng karne-peptone PV - tubig ng peptone
		Komplikado	Dugo agar YSA - yolk salt agar Giss Wednesday
	Sa pamamagitan ng appointment	Pangunahing	MPA BCH
		Halalan	JSA Alkaline agar Alkaline Peptone Water
		Pagkakaiba - diagnostic	Endo Levin Ploskireva Gissa Russel
		Espesyal	Wilson-Blair Kitta-Tarozzi Thioglycolic sabaw Gatas ayon kay Tukaev
	Sa pamamagitan ng pagkakapare-pareho	Siksik	Dugo agar Alkaline agar
		Likido	BCH Ang PV
		Semi-likido	Semi-liquid agar
	Sa pamamagitan ng pinagmulan	Natural	MPA BCH
		Semi-synthetic	Endo Saburo
		Gawa ng tao	Kozzer Simmonson

Talahanayan 7.2. Mga prinsipyo ng paghihiwalay ng purong kultura ng cell.

Mekanikal na prinsipyo	Prinsipyo ng biyolohikal
PARAAN 1. Fractional dilutions ng L. Pasteur 2. Mga dilat ng plato R. Koch 3. Ibabaw ng mga pananim Drigalsky 4. Mga stroke sa ibabaw	PARAAN Isaalang-alang ang: a - uri ng paghinga (pamamaraang Fortner); b - kadaliang kumilos (pamamaraan ni Shukevich); c - paglaban ng acid; d - sporulation; d - pinakamainam na temperatura; e - pumipili ng mga hayop sa laboratoryo sa bakterya

Talahanayan 7.2.1. Mga yugto ng paghihiwalay ng purong kultura ng cell.

№	Yugto	Katangian
	Pananaliksik sa yugto 1	Alisin ang materyal na pathological. Pinag-aaralan ito - hitsura, pagkakapare-pareho, kulay, amoy at iba pang mga palatandaan, isang pahid ang inihanda, pininturahan at sinuri sa ilalim ng isang mikroskopyo.
	Pananaliksik sa yugto 2	Sa ibabaw ng isang siksik na daluyan ng nutrient, ang mga mikroorganismo ay bumubuo ng isang tuloy-tuloy, siksik na paglaki o mga nakahiwalay na kolonya.Ang kolonya - Ito ang mga naipong bakterya na nakikita ng hubad na mata sa ibabaw o sa kapal ng medium ng nutrient. Bilang isang patakaran, ang bawat kolonya ay nabuo mula sa mga supling ng isang microbial cell (mga clone), samakatuwid ang kanilang komposisyon ay medyo magkatulad. Ang mga tampok ng paglaki ng bakterya sa nutrient media ay isang pagpapakita ng kanilang mga katangiang pangkultura.
	Pananaliksik sa yugto ng 3	Ang likas na katangian ng paglago ng isang purong kultura ng mga mikroorganismo ay pinag-aaralan at isinasagawa ang pagkakakilanlan nito.

Talahanayan 7.3. Pagkilala sa bakterya.

№	Pangalan	Katangian
	Pagkilala sa biochemical	Pagtukoy ng uri ng pathogen ng mga katangian ng biochemical nito
	Pagkilala sa Serological	Upang maitaguyod ang mga species ng bakterya, ang kanilang istrakturang antigenic ay madalas na pinag-aralan, iyon ay, nakikilala sila ng mga katangian ng antigenic.
	Pagkilala sa pamamagitan ng mga biological na katangian	Minsan ang mga bakterya ay nakikilala sa pamamagitan ng paghawa sa mga hayop sa laboratoryo na may isang purong kultura at pagmamasid sa mga pagbabago na sanhi ng mga pathogens sa katawan.
	Pagkilala sa kultura	Pagtukoy ng uri ng mga pathogens ayon sa kanilang mga katangian sa kultura
	Pagkilala sa morphological	Pagtukoy ng uri ng bakterya ayon sa kanilang mga katangian na morphological

Mga pagsubok sa kontrol sa rating

1. Alin sa mga proseso ang hindi nauugnay sa pisyolohiya ng bakterya?

1. Taas

2. Pagpaparami

3. Mutasyon

4. Nutrisyon

1. Anong mga sangkap ang bumubuo ng 40 - 80% ng tuyong masa ng isang bacterial cell?

1. Mga Karbohidrat

2. Protina

3. Mga taba

4. Nucleic acid

1. Anong mga uri ng mga enzyme ang na-synthesize ng mga mikroorganismo?

1. Oxy reductase

2. Lahat ng klase

3. Mga paglipat

4. Ligases

1. Ang mga enzim, ang konsentrasyon ng alin sa cell ay matalim na tumataas bilang tugon sa hitsura ng isang inducer substrate sa daluyan?

1. Hindi maalaman

2. Konstitusyonal

3. Mapanupil

4. Mga kumplikadong Multienzyme

1. Isang enzyme ng pathogenicity na isinekreto ng Staphylococcus aureus?

1. Neuraminidase

2. Hyaluronidase

3. Lecithinase

4. Fibrinolysin

1. Gumagawa ba ang isang proteolytic enzyme na gumana?

1. Pagkasira ng protina

2. Paghiwalay ng taba

3. Pagkasira ng mga karbohidrat

4. Pagbuo ng Alkali

1. Fermentation ng Enterobacteriaceae?

1. Lactic acid

2. Formic acid

3. Propionic acid

4. Butyric acid

1. Anong mga compound ng mineral ang ginagamit upang maiugnay ang t-RNA sa mga ribosome?

1. NH4

2. K +

3. Fe2 +

4. Mg2 +

1. Ang biological oxidation ay ...?

1. Nutrisyon

2. Pagpaparami

3. Hininga

4. Pagkamatay ng cell

1. Anu-anong mga sangkap ang nag-synthesize ng lahat ng mga sangkap na naglalaman ng carbon ng cell mula sa CO2.

1. Prototrophs

2. Mga heterotroph

3. Mga Autotroph

4. Saprophytes

1. Ang media ng kultura ay naiiba:

1. Sa pamamagitan ng komposisyon

2. Sa pamamagitan ng pagkakapare-pareho

3. Sa pamamagitan ng appointment

4. Lahat ng nabanggit

1. Ang reproductive phase, alin ang nailalarawan sa isang balanse sa pagitan ng bilang ng mga patay, bagong nabuo at hindi natutulog na mga cell?

1. Lag phase

2. Pag-log phase

3. Negatibong yugto ng pagpapabilis

4. Nakatigil na yugto

1. Nakasalalay ang tagal ng henerasyon?

1. Mga species

2. Edad

3. Populasyon

4. Lahat ng nabanggit

1. Upang maitaguyod ang mga species ng bakterya, ang kanilang istrakturang antigenic ay madalas na pinag-aralan, iyon ay, isinasagawa ang pagkakakilanlan, alin?

1. Biyolohikal

2. Morpolohikal

3. Serolohikal

4. Biokimikal

1. Ang pamamaraang paghahasik sa ibabaw ni Drygalski ay tinukoy bilang ...?

1. Mga prinsipyong mekanikal ng paghihiwalay ng purong kultura

2. Mga simulain ng biyolohikal ng paghihiwalay ng purong kultura

Bibliograpiya

1. Borisov LB Medikal microbiology, virology, immunology: isang aklat para sa honey. unibersidad. - M.: LLC "Medikal na Ahensya ng Impormasyon", 2005.

2. Pozdeev OK Medical microbiology: isang aklat-aralin para sa honey. unibersidad. - M.: GEOTAR-MED, 2005.

3. Korotyaev AI, Babichev SA Medical microbiology, immunology at virology / textbook para sa honey. unibersidad. - SPb.: SpetsLit, 2000.

4. Vorobiev A.A., Bykov A.S., Pashkov E.P., Rybakova A.M. Microbiology: aklat-aralin. - M.: Gamot, 2003.

5. Medical microbiology, virology at immunology: aklat / ed. V. V. Zvereva, M. N. Boychenko. - M.: GEOTar-Media, 2014.

6. Patnubay sa praktikal na pagsasanay sa medikal na microbiology, virology at immunology / ed. V.V. Teza. - M.: Gamot, 2002.

Nilalaman

Panimula 6

Ang komposisyon ng bakterya mula sa pananaw ng kanilang pisyolohiya. 7

Metabolism 14

Nutrisyon (transportasyon ng mga nutrisyon) 25

Taas 29

Huminga 31

Pag-aanak 34

Mga pamayanang mikrobyo 37

APENDIKO 49

Mga Pagsubok 102

Mga Sanggunian 105

…………..

…………

Ang ilang mga sakit sa tao ay naiugnay sa pagkakalantad sa mga microbes sa katawan. Kapag ang mga nasabing sakit ay nangyayari sa katawan ng tao, nagaganap ang mga kumplikadong pagbabago, ang mga function ng proteksiyon ay napakilos, na naglalayong labanan ang mga nakulong na microbes.

Kabilang sa malaking bilang ng mga mikroorganismo, may mga may kakayahang magdulot ng mga sakit sa mga tao, hayop at halaman. Ang mga ito ay tinatawag na pathogenic o sanhi ng sakit. Ang pagiging tiyak ay katangian ng mga pathogenic microorganism - ang bawat uri ng mga ito ay may kakayahang magdulot lamang ng isang tiyak na sakit sa lahat ng mga palatandaan na katangian. Karamihan sa mga pathogenic microorganism ay mga parasite microbes, dahil nakakapamuhay sila ng mga sangkap ng isang nabubuhay na organismo.

Ang mga pathogenic microbes ay gumagawa ng mga espesyal na sangkap - mga lason na nakakalason sa katawan at nagdudulot ng isang masakit na kondisyon. Ang kakayahan ng mga mikroorganismo na maging sanhi ng sakit ay tinatawag na pathogenicity. Maaari itong maipakita sa iba't ibang degree. Ang antas ng pathogenicity ay tinatawag na virulence.Ang pagkabulok ng mga microbes ay maaaring dagdagan o bawasan pareho sa natural at pang-eksperimentong kondisyon.

Sa ilalim ng term na "impeksyon»Maunawaan ang proseso ng pakikipag-ugnay ng mga microbes sa katawan ng tao, bilang isang resulta kung saan nangyayari ang isang nakakahawang sakit. Ang mga mapagkukunan ng impeksiyon ay, una sa lahat, mga taong may sakit at hayop na naglalabas ng mga pathogens sa panlabas na kapaligiran, pati na rin ang mga tao at hayop na gumaling mula sa karamdaman, kung saan ang katawan ng mga pathogenic microbes ay patuloy na mananatili sa ilang oras (minsan napakatagal) pagkatapos paggaling. Ang mga tao at hayop na naglalabas ng mga pathogenic microbes pagkatapos ng paggaling ay tinatawag na bacteria carrier o bacteria excretors. Ang mga taong hindi may sakit ay maaari ding maging carrier ng bakterya. Ang mga pathogenic microbes na nakahiwalay ng may sakit na organismo ay pumasok sa hangin, lupa, tubig, mga nakapaligid na bagay at pagkain, kung saan maaari silang manatiling mabubuhay nang higit pa o mas mahaba sa isang mahabang panahon, depende sa uri ng mga microbes.

Ang mga pathogenic microbes ay pumapasok sa katawan ng tao sa iba't ibang paraan: sa pamamagitan ng direktang pakikipag-ugnay sa isang taong maysakit, sa pamamagitan ng hangin na may pinakamaliit na patak ng uhog at laway na itinago ng pasyente kapag umuubo o nagbahin (impeksyon sa droplet). Ang mga mikrobyo - ang mga sanhi na ahente ng ilang mga sakit - ay pinalabas ng mga pasyente na may dumi at ihi. Ang mga nasabing microbes ay pumapasok sa katawan ng isang malusog na tao sa pamamagitan ng maruming mga kamay na hindi pa nahugasan pagkatapos gamitin ang banyo. Ang mga kontaminadong kamay ay nagkalat din ng mga pathogens sa pagkain. Ang mga causative agents ng impeksyon sa bituka ay tumagos din sa isang malusog na katawan kapag natupok ang kontaminadong tubig.

Ang mga insekto at daga ay madalas na tagapagdala ng mga nakakahawang sakit. Ang mga langaw ay maaaring magdala ng mga causative agents ng typhoid fever at disentery, kuto - typhus, ilang uri ng lamok - malaria, atbp. Ang mga daga at daga ay namamahagi ng mga causative agents ng salot, tularemia, anthrax.

Ang pagtagos ng mga pathogenic microbes sa katawan ng tao ay hindi palaging humahantong sa sakit nito. Sa simula at kurso ng sakit, ang mga katangian ng pathogenic microbes na tumagos sa katawan, ang kanilang bilang at aktibidad, pati na rin ang lugar ng kanilang pagpapakilala sa katawan at ang estado ng katawan mismo ay may mahalagang papel.

Para sa pagpaparami ng mga pathogenic microorganism, kinakailangan ang kanais-nais na mga kondisyon, at lilitaw ito kapag ang katawan ng tao ay humina at ang kakayahang pang-proteksiyon ay nabawasan (dahil sa hypothermia, gutom, atbp.). Ang pagkamaramdamin sa mga impeksyon ay nakasalalay din sa edad (sa mga bata at matatanda, mas mataas ito kaysa sa mga may sapat na gulang).

Mula sa sandali na pumasok ang mga pathogenic microbes sa katawan ng tao hanggang sa lumitaw ang mga palatandaan ng sakit, ang isang tiyak na tagal ng oras ay karaniwang lumilipas - tinatawag itong tago na panahon ng sakit, o pagpapapisa ng itlog. Sa oras na ito, mayroong isang pagpaparami ng mga pathogenic microbes sa katawan at ang akumulasyon ng mga nakakapinsalang produkto ng kanilang mahalagang aktibidad. Ang tagal ng panahon ng pagpapapasok ng itlog para sa iba't ibang mga sakit ay hindi pareho. Tumatagal ito mula sa maraming araw (trangkaso, tetanus, disenteriya) hanggang sa maraming linggo (tipus, typhoid fever), at kung minsan umabot ng maraming buwan (rabies) at kahit na taon (ketong).

Kung nakakita ka ng isang error, mangyaring pumili ng isang piraso ng teksto at pindutin ang Ctrl + Enter.

    Culture Media - mga substrate na binubuo ng mga bahagi na nagbibigay ng mga kinakailangang kondisyon para sa paglilinang ng mga mikroorganismo o ang akumulasyon ng kanilang mga produktong basura

.

    Culture Media naiiba sa layunin, pagkakapare-pareho at komposisyon. Ayon sa kanilang layunin, sila ay regular na nahahati sa dalawang pangunahing mga pangkat - mga kapaligiran sa diagnostic at produksyon. Ang media ng kultura ng diagnostic ay may kasamang limang mga subgroup: media para sa lumalagong isang malawak na hanay ng mga mikroorganismo; daluyan para sa paghihiwalay ng isang tukoy na pathogen; nagpapahintulot sa pagkakaiba-iba ng media na makilala sa pagitan ng ilang mga uri ng mga mikroorganismo; ang media para sa pagkilala ng mga mikroorganismo at imbakan ng media na inilaan para sa pagpapayaman ng isang tukoy na uri ng mga mikroorganismo. Kasama sa produksyon ang P. na may. ginamit sa pang-industriya na produksyon ng mga produktong biological na nakapagpapagaling (bakuna sa bakterya, toxoids, atbp.) at ang kanilang kontrol sa kalidad.Ang kulturang media para sa paggawa ng mga paghahanda sa bakterya, taliwas sa diagnostic media, ay hindi dapat maglaman ng mga impurities na nakakasama sa mga tao at may negatibong epekto sa proseso ng produksyon (nang hindi nakakagambala, lalo na, sa pagtanggal ng mga produkto ng microbial metabolism, ballast organic at mineral na sangkap mula sa mga handa na paghahanda).

Sa pamamagitan ng pagkakapare-pareho, likido, siksik at semi-likidong media ay nakikilala. Ang solid at semi-likidong nutrient media ay inihanda mula sa likidong media sa pamamagitan ng pagdaragdag ng agar o (mas madalas) na gulaman sa kanila. Ang Agar agar ay isang polysaccharide na nagmula sa ilang mga pagkakaiba-iba ng damong-dagat. Karaniwang ipinakilala si Agar sa P. kasama. sa isang konsentrasyon ng 1-2% (sa paggawa ng semi-likidong media - 0.2-0.4%), gelatin - 10-15%. Sa t ° 25-30 ° gelatinous media natunaw, samakatuwid ang mga mikroorganismo ay lumago sa mga ito higit sa lahat sa temperatura ng kuwarto. Ang cloted blood serum, pinagsama itlog, patatas, at media na naglalaman ng 1.5% silica gel ay ginagamit din bilang solid media.

Sa mga tuntunin ng komposisyon, ang media culture ay nahahati sa simple at kumplikado. Simpleng P. kasama. ibigay ang mga pangangailangan sa nutrisyon ng karamihan sa mga pathogenic microorganism (sabaw ng mesopatamia, mesopatamia agar, sabaw ng Hottinger at agar, masustansyang gulaman, tubig ng peptone, atbp.). Kasama sa kumplikadong media ang espesyal na media para sa mga microbes na hindi lumalaki sa simpleng nutrient media. Ang nasabing media ay inihanda sa pamamagitan ng pagdaragdag ng dugo, suwero, karbohidrat at iba pang mga sangkap na kinakailangan para sa pagpaparami ng isang partikular na mikroorganismo sa simpleng media. Komplikadong P. kasama. ay din kaugalian diagnostic media, halimbawa, ang Giss media na may mga karbohidrat at isang tagapagpahiwatig, na ginagamit upang matukoy ang mga species ng microbe na pinag-aaralan ng aktibidad na ito ng enzymatic. Ang ilang mga kumplikadong media, ang tinaguriang pumipili, o elektibo, ay ginagamit para sa naka-target na paghihiwalay ng isa o maraming uri ng mga mikroorganismo sa pamamagitan ng paglikha ng pinakamainam na kundisyon para sa kanilang paglaki at pagsugpo sa paglaki ng kasamang microflora. Halimbawa, ang bismuth sulfite agar ay isang mahigpit na pumipili na daluyan para sa paghihiwalay ng Salmonella, agar at medium ng Levin ay mahina na pumipili ng media para sa paghihiwalay ng enterobacteria.

Nakasalalay sa komposisyon ng mga panimulang bahagi, nakikilala rin ang gawa ng tao, semi-gawa ng tao at natural na media. Ang synthetic media, ang mga bahagi na tiyak na kilala, at sa isang medyo mas kaunting sukat na gawa ng tao, ay maginhawa at ginagamit pangunahin para sa pag-aaral ng mga proseso ng pisyolohikal ng mga mikroorganismo. Ang paggamit ng media ng ganitong uri ay ginagawang posible upang matukoy ang pinakamaliit na kinakailangan ng mga indibidwal na mikroorganismo para sa mga sustansya at, sa batayan na ito, lumikha ng nutrient media na naglalaman lamang ng mga compound na kinakailangan para sa paglago ng isang naibigay na microbe. Ang bentahe ng synthetic culture media ay ang kanilang pamantayan, subalit, ang paggamit ng media na ito ay limitado dahil sa mataas na gastos at pagiging kumplikado ng komposisyon ng marami sa kanila (madalas na naglalaman sila ng hanggang sa 40 o higit pang mga sangkap). Bilang karagdagan, mas sensitibo sila sa mga hindi balanse sa pagitan ng ilan sa mga bahagi ng P. , lalo na ang mga amino acid, at ang paglaki ng mga mikroorganismo sa naturang media ay mas madaling mapigilan ng labis na aeration o nakakalason na mga kation.

Sa kasanayan sa microbiological, ang media ng likas na pinagmulan ay patuloy na malawak na ginagamit, ang komposisyon ng kemikal na hindi alam. Ang batayan ng naturang media ay ginawa mula sa iba't ibang mga hilaw na materyales na pinagmulan ng hayop o gulay: karne at mga kahalili nito, isda, dugo ng hayop, kasein, lebadura, patatas, soybeans, atbp. Ang kanilang mga kapaligiran mismo.

Kasama ang mga base ng protina, ang nutrient media ay dapat maglaman ng mga elemento ng abo (posporus, asupre, kaltsyum, magnesiyo, bakal) at mga elemento ng pagsubaybay (boron, molibdenum, kobalt, mangganeso, sink, nikel, tanso, murang luntian, sosa, silikon, atbp.). Ang mga sangkap na ito ay kinakailangan para sa maraming mga proseso ng biosynthetic sa bakterya, ngunit ang pangangailangan para sa mga ito sa iba't ibang mga uri ng mga mikroorganismo ay hindi pareho. Halimbawa, ang manganese at iron ay kinakailangan para sa E. coli at pest pathogens, at potassium para sa lactic acid bacteria. Ang mangganeso, kaltsyum, magnesiyo, potasa at iron ay nagpapasigla sa paglago ng anthrax bacillus, at magnesiyo, iron at manganese na nagpapasigla sa paglago ng brucella.

Para sa paglilinang ng maraming mga pathogenic microorganism, kinakailangan ang pagkakaroon ng daluyan ng tinatawag na mga kadahilanan ng paglaki, na kinakatawan lalo na ng mga nalulusaw na tubig na bitamina. Kahit na ang bakterya ay hindi gumagamit ng mga sangkap na ito bilang isang plastik o masiglang materyal, gayunpaman ang mga ito ay kailangang-kailangan na mga sangkap ng nutrient media, dahil Pinipigilan ng kanilang kawalan ang pagbuo ng maraming mga enzyme. Ang ilang mga organikong acid, base ng purine at pyrimidine at mga amino acid ay maaari ding maging mga kadahilanan ng paglago. Ang ilang mga amino acid (L-cystine, D-pyroglutamic acid, atbp.) Ay nakapagpasigla ng paglaki ng ilang mga mikroorganismo at, sa kabaligtaran, pinipigilan ang paglaki ng iba.

    Culture Media dapat maglaman ng lahat ng mga sangkap ng kemikal na kinakailangan para sa mga lumago na mikroorganismo sa isang madaling maipalagay na form at sa pinakamainam na dami. Ang mapagkukunan ng carbon sa P. s. Karaniwan mayroong mga indibidwal na karbohidrat, asing-gamot ng mga organikong acid, pati na rin ang carbon, na bahagi ng mga naglalaman ng nitrogen na mga compound (protina, peptone, amino acid, atbp.). Natugunan ang mga kinakailangan sa nitrogen kung mayroong isang katutubong protina ng hayop sa media (dugo, suwero, ascitic fluid, atbp.), Peptone, amino acid, ammonium salts at iba pang mga sangkap na naglalaman ng nitrogen (mga base ng purine at pyrimidine, urea, atbp.) . V nutrient media gumawa ng mga mineral na asing-gamot na kinakailangan para sa mga mikroorganismo. Ang mga microelement na kinakailangan ng bakterya sa mga bale-wala na halaga ay karaniwang nakakapasok sa nutrient media alinman sa tubig, na ginagamit upang ihanda ang daluyan, o sa mga hilaw na materyales na bahagi ng medium ng nutrient. Ang mga kadahilanan ng paglago ay pumapasok sa kapaligiran na may iba't ibang mga dialysate, extract at autolysates sa anyo ng mga amino acid, peptide, purine at pyrimidine base at bitamina.

Ang mga hilaw na sangkap na naglalaman ng protina na ginagamit para sa paghahanda ng culture media ay hydrolyzed gamit ang iba't ibang mga enzyme (pepsin, trypsin, pancreatin, papain, fungal proteases, atbp.) O mga acid (hindi gaanong madalas na alkalis). Ang layunin ng hydrolysis ay upang matunaw at masira ang protina sa pagbuo ng mga nitrogenous compound na assimilated ng microbial cell: peptones, polypeptides, amino acid, na bahagi ng hydrolysates na nakuha sa ganitong paraan. Upang masiyahan ang mga pangangailangan sa nutrisyon ng bawat tukoy na uri ng microorganism, ginagamit ang mga ito o ang mga hydrolysates, depende sa kanilang kemikal na komposisyon, o sa komposisyon ng P. na may. maraming mga hydrolysates ang ipinakilala nang sabay sa mga ginamit na ratios.

Dinisenyo P. kasama. ayon sa komposisyon at mga katangian ng physicochemical nito, dapat itong tumutugma sa mga kondisyon ng natural na tirahan ng mga mikroorganismo. Ang mga pagkakaiba sa kanilang mga pangangailangan sa nutrisyon ay magkakaiba-iba na ibinubukod nila ang posibilidad na lumikha ng isang pangkalahatang P. kasama. Samakatuwid, ang mga modernong prinsipyo ng disenyo ng media ay batay sa isang komprehensibong pag-aaral ng mga kinakailangang nutrisyon ng mga mikroorganismo.

Kinakailangan na ang nutrient media ay hindi lamang naglalaman ng mga nutrient na kinakailangan para sa microbes, ngunit mayroon ding isang pinakamainam na konsentrasyon ng mga hydrogen at hydroxyl ions. Karamihan sa mga pathogenic microorganism ay lumalaki nang mas mahusay sa nutrient media na may isang bahagyang alkalina na reaksyon (PH 7.2-7.4).Ang mga pagbubukod ay Vibrio cholerae, ang pinakamabuting kalagayan ng paglaki na kung saan ay nasa alkaline zone (PH 8.5-9.0), at ang causative agent ng tuberculosis, na nangangailangan ng mahina na acidic na reaksyon (PH 6.2-6.8). Upang maiwasan ang pagbabago sa pH sa panahon ng paglilinang ng mga mikroorganismo sa P. na may. magdagdag ng mga buffer ng pospeyt - isang halo ng mono- at disubstituted potassium phosphates, ang konsentrasyon na sa daluyan ay hindi dapat lumagpas sa 0.5%.

    Culture Media dapat magkaroon ng sapat na kahalumigmigan at maging isotonic para sa microbial cell, na tinitiyak ang normal na kurso ng pinakamahalagang proseso ng pisikal at kemikal dito. Para sa karamihan ng mga mikroorganismo, ang pinakamainam na kapaligiran ay 0.5% na solusyon ng sodium chloride. Ang isa sa mga mahahalagang kinakailangan para sa culture media ay ang kanilang pagiging sterility, na ginagawang posible na palaguin ang mga purong kultura ng mga microbes.

Isang mahalagang papel sa resibo ni P. ayon sa pahina. ang wastong kalidad ay kabilang sa mga pamamaraan ng kanilang kontrol. Para sa nutrient media na ginamit sa paggawa, ang pangunahing tagapagpahiwatig ng kalidad ay ang kahusayan (ani) ng media, ibig sabihin ang kakayahang makaipon ng pinakamataas na halaga ng biomass ng mga mikroorganismo ng buong mga katangian o mga produkto ng kanilang biosynthesis (mga lason, atbp.). Sa pagtatasa ng diagnostic na nutrient media, ang nangungunang pamantayan ay ang tagapagpahiwatig ng pagiging sensitibo - ang kakayahang matiyak ang paglaki ng mga mikroorganismo sa pinakamataas na dilutions ng kultura ng pathogen. Nakasalalay sa layunin ng nutrient media sa pagtatasa ng kanilang kalidad, ginagamit din ang iba pang mga tagapagpahiwatig - ang katatagan ng mga pangunahing katangian ng mga lumalagong microorganism at ang rate ng kanilang paglaki, ang tindi ng mga pagkakaiba-iba ng mga katangian, atbp.

Kapag nalulutas ang mga isyu sa kalidad ng nutrient media, ang mahalagang kahalagahan ay nakakabit sa kanilang pamantayan, na pinadali ng paggawa ng media sa anyo ng mga tuyong paghahanda. Sa USSR, ang pang-industriya na paggawa ng dry media para sa iba't ibang mga layunin ay naitatag: simple, pumipili, magkakaibang diagnostic at espesyal.

Bibliograpiya: Yu.A. Kozlov Culture Media sa medikal na microbiology, M., 1950, bibliogr.; Mga pamamaraan ng pagsasaliksik sa laboratoryo sa klinika, ed. V.V. Menshikov, s. 315, 343, M., 1987; Meinell J. at Meinell E. Pang-eksperimentong Microbiology, trans. mula sa English, p. 46, M., 1967; Mga pamamaraan ng pagsasaliksik sa microbiological sa mga nakakahawang sakit, ed. G.Ya. Sina Sina at O.G. Birger, s. 64, M., 1949; Enterobacteriaceae, ed. SA AT. Pokrovsky, p. 258, M., 1985.

Pansin Artikulo 'Culture Media'Ay ibinigay para sa mga layuning pang-impormasyon lamang at hindi dapat gamitin para sa gamot sa sarili